CAJ | 학술논문

以巴西橡胶树(Hevea brasiliensis)胶乳的RNA为Tester;叶片RNA为Driver,利用抑制消减杂交法(suppressive subtractive hybridization,SSH)构建了一个胶乳特异表达基因差减文库.通过反式Northern点杂交(reverse Northern dot blots)筛选到一个与顺式异戊烯基转移酶基因(橡胶生物合成的关键酶基因)高度同源的阳性克隆R363.采用RACE方法获得该克隆的全长cDNA(GenBank登陆号:AY461414).序列分析表明,该基因长1156 bp,含有873 bp的阅读框,编码290个氨基酸,分子量约为32.9 kD,等电点为7.2,含有N-端跨膜螺旋区.同源性分析表明R363编码的蛋白质具有异戊烯基转移酶家族的特征,含有cis-异戊烯基链转移酶的5个高度保守区,推测R363可能是一种新的顺式-异戊烯基转移酶基因.Northern blot分析显示,R363在胶乳中高度表达,在叶中不表达.乙烯处理前后表达强度一致,表明该基因表达不为乙烯所诱导.
이파서상효수(Hevea brasiliensis)효유적RNA위Tester;협편RNA위Driver,이용억제소감잡교법(suppressive subtractive hybridization,SSH)구건료일개효유특이표체기인차감문고.통과반식Northern점잡교(reverse Northern dot blots)사선도일개여순식이무희기전이매기인(상효생물합성적관건매기인)고도동원적양성극륭R363.채용RACE방법획득해극륭적전장cDNA(GenBank등륙호:AY461414).서렬분석표명,해기인장1156 bp,함유873 bp적열독광,편마290개안기산,분자량약위32.9 kD,등전점위7.2,함유N-단과막라선구.동원성분석표명R363편마적단백질구유이무희기전이매가족적특정,함유cis-이무희기련전이매적5개고도보수구,추측R363가능시일충신적순식-이무희기전이매기인.Northern blot분석현시,R363재효유중고도표체,재협중불표체.을희처리전후표체강도일치,표명해기인표체불위을희소유도.