中山大学学报（医学科学版）
中山大學學報（醫學科學版）
중산대학학보（의학과학판）
JOURNAL OF SUN YAT-SEN UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCES)
2011年
3期
406-410
,共5页
张珍真%王佳佳%谭炳炎%王娴%郑琳%常颖%朱惠莲
張珍真%王佳佳%譚炳炎%王嫻%鄭琳%常穎%硃惠蓮
장진진%왕가가%담병염%왕한%정림%상영%주혜련
血浆%甜菜碱%游离胆碱%稳定性%高效液相色谱串联质谱
血漿%甜菜堿%遊離膽堿%穩定性%高效液相色譜串聯質譜
혈장%첨채감%유리담감%은정성%고효액상색보천련질보
[目的]建立高效液相色谱串联质谱法(HPLC-MS/MS)测定血浆甜菜碱和游离胆碱水平，并研究血浆中两种物质的稳定性。[方法]以d9-氯化胆碱、d9-甜菜碱为内标，血浆经乙腈除蛋白后，采用SiO2柱(2.1 mm×100mm，5μm)乙腈-甲酸铵缓冲液(15 mmol/L，pH=3.5)等度洗脱，经电喷雾电离，选择多反应监测模式(MRM)同时测定血浆中甜菜碱和游离胆碱。[结果]血浆中甜菜碱和游离胆碱得到良好分离，最低定量限均为0.62 μmol/L，线性范围均为0.62～400 μmol/L。对游离胆碱的测定，日内相对标准差(RSD)为5.10％～5.85％，日间RSD为4.54％～13.26％，回收率94.15％～103.70％;对甜菜碱的测定，日内RSD为3.60％～7.30％，日间RSD为2.70％～8.10％，回收率90.03％～103.88％。稳定性研究中，游离胆碱和甜菜碱浓度随保存时间及温度增加，游离胆碱在血浆分离48 h内变化小于15％，甜菜碱超过3 h后变化即大于15％。3个反复冻融循环内游离胆碱浓度稳定；甜菜碱变化明显，第一个冻融循环后即增加至原始浓度3倍。[结论]高效液相色谱串联质谱法同时检测血浆中甜菜碱和游离胆碱是一种快速、准确且灵敏的方法。血浆保存时应注意保存温度、时间及反复冻融对血浆中甜菜碱和游离胆碱浓度的影响。
[目的]建立高效液相色譜串聯質譜法(HPLC-MS/MS)測定血漿甜菜堿和遊離膽堿水平，併研究血漿中兩種物質的穩定性。[方法]以d9-氯化膽堿、d9-甜菜堿為內標，血漿經乙腈除蛋白後，採用SiO2柱(2.1 mm×100mm，5μm)乙腈-甲痠銨緩遲液(15 mmol/L，pH=3.5)等度洗脫，經電噴霧電離，選擇多反應鑑測模式(MRM)同時測定血漿中甜菜堿和遊離膽堿。[結果]血漿中甜菜堿和遊離膽堿得到良好分離，最低定量限均為0.62 μmol/L，線性範圍均為0.62～400 μmol/L。對遊離膽堿的測定，日內相對標準差(RSD)為5.10％～5.85％，日間RSD為4.54％～13.26％，迴收率94.15％～103.70％;對甜菜堿的測定，日內RSD為3.60％～7.30％，日間RSD為2.70％～8.10％，迴收率90.03％～103.88％。穩定性研究中，遊離膽堿和甜菜堿濃度隨保存時間及溫度增加，遊離膽堿在血漿分離48 h內變化小于15％，甜菜堿超過3 h後變化即大于15％。3箇反複凍融循環內遊離膽堿濃度穩定；甜菜堿變化明顯，第一箇凍融循環後即增加至原始濃度3倍。[結論]高效液相色譜串聯質譜法同時檢測血漿中甜菜堿和遊離膽堿是一種快速、準確且靈敏的方法。血漿保存時應註意保存溫度、時間及反複凍融對血漿中甜菜堿和遊離膽堿濃度的影響。
[목적]건립고효액상색보천련질보법(HPLC-MS/MS)측정혈장첨채감화유리담감수평，병연구혈장중량충물질적은정성。[방법]이d9-록화담감、d9-첨채감위내표，혈장경을정제단백후，채용SiO2주(2.1 mm×100mm，5μm)을정-갑산안완충액(15 mmol/L，pH=3.5)등도세탈，경전분무전리，선택다반응감측모식(MRM)동시측정혈장중첨채감화유리담감。[결과]혈장중첨채감화유리담감득도량호분리，최저정량한균위0.62 μmol/L，선성범위균위0.62～400 μmol/L。대유리담감적측정，일내상대표준차(RSD)위5.10％～5.85％，일간RSD위4.54％～13.26％，회수솔94.15％～103.70％;대첨채감적측정，일내RSD위3.60％～7.30％，일간RSD위2.70％～8.10％，회수솔90.03％～103.88％。은정성연구중，유리담감화첨채감농도수보존시간급온도증가，유리담감재혈장분리48 h내변화소우15％，첨채감초과3 h후변화즉대우15％。3개반복동융순배내유리담감농도은정；첨채감변화명현，제일개동융순배후즉증가지원시농도3배。[결론]고효액상색보천련질보법동시검측혈장중첨채감화유리담감시일충쾌속、준학차령민적방법。혈장보존시응주의보존온도、시간급반복동융대혈장중첨채감화유리담감농도적영향。
