中华肝胆外科杂志
中華肝膽外科雜誌
중화간담외과잡지
CHINESE JOURNAL OF HEPATOBILIARY SURGERY
2007年
5期
323-327
,共5页
刘权焰%刘志苏%邬开朗%朱应%何跃明%吴建国
劉權燄%劉誌囌%鄔開朗%硃應%何躍明%吳建國
류권염%류지소%오개랑%주응%하약명%오건국
癌%肝细胞%siRNA%MAT2A%细胞凋亡
癌%肝細胞%siRNA%MAT2A%細胞凋亡
암%간세포%siRNA%MAT2A%세포조망
目的 探讨MAT2A小干扰:RNA对荷瘤鼠肝癌细胞生长和细胞凋亡的影响.方法 采用脂质体转染法将MAT2A小干扰RNA质粒表达载体转染人肝癌细胞系Bel-7402细胞,建立持续转录小干扰RNA的细胞系,并将该细胞系皮下接种裸鼠,观察肿瘤生长情况;为进一步观察裸鼠体内抑瘤性,将皮下接种稳定表达小于扰RNA的Bel-7402细胞系的裸鼠分为三组:A、盐水对照组,B、空质粒对照组,C、siRNA治疗组;于接种后第12天,每组动物行纯化质粒DNA瘤内注射,观察肿瘤大小;治疗后2周,处死所有动物,取肿瘤,测量大小;部分石蜡包埋切片、HE染色,部分进行凋亡检测.结果 得到稳定转染siRNA载体、并能持续表达siRNA的Bel-7402细胞系,将稳定建系的细胞传代,持续表达siRNA细胞系肿瘤细胞生长明显缓慢.皮下接种建系的Bel-7402细胞建立荷瘤鼠模型,可以观察到siRNA组肿瘤生长缓慢,平均第13天才长出皮下可及、但肉眼看不到的肿瘤,而接种control siRNA组,平均第9天可长出肉眼可见的肿瘤;用裸鼠肿瘤模型观察siRNA的体内抑瘤效果,质粒DNA注射后,对照组瘤体10.93mm3,空质粒对照组为11.13 mm3,而siRNA质粒转染组为4.26 mm3(P＜0,01);HE染色显示,对照组和空质粒组质粒DNA注射后,病灶充满肿瘤细胞;而siRNA组质粒DNA注射后,病灶内有大量炎性细胞浸润,坏死明显,仅见少量肿瘤细胞;且siRNA明显诱导荷瘤鼠肝癌细胞凋亡,其凋亡指数为(28.79±2.13)%,较盐水对照组(9.54±1.89)%和空质粒治疗组(10.24±2.06)%明显升高(t=15.41,P＜0.01).结论 靶向MAT2A基因的siRNA诱导荷瘤鼠肝癌细胞凋亡,抑制肝癌细胞生长.
目的 探討MAT2A小榦擾:RNA對荷瘤鼠肝癌細胞生長和細胞凋亡的影響.方法 採用脂質體轉染法將MAT2A小榦擾RNA質粒錶達載體轉染人肝癌細胞繫Bel-7402細胞,建立持續轉錄小榦擾RNA的細胞繫,併將該細胞繫皮下接種裸鼠,觀察腫瘤生長情況;為進一步觀察裸鼠體內抑瘤性,將皮下接種穩定錶達小于擾RNA的Bel-7402細胞繫的裸鼠分為三組:A、鹽水對照組,B、空質粒對照組,C、siRNA治療組;于接種後第12天,每組動物行純化質粒DNA瘤內註射,觀察腫瘤大小;治療後2週,處死所有動物,取腫瘤,測量大小;部分石蠟包埋切片、HE染色,部分進行凋亡檢測.結果 得到穩定轉染siRNA載體、併能持續錶達siRNA的Bel-7402細胞繫,將穩定建繫的細胞傳代,持續錶達siRNA細胞繫腫瘤細胞生長明顯緩慢.皮下接種建繫的Bel-7402細胞建立荷瘤鼠模型,可以觀察到siRNA組腫瘤生長緩慢,平均第13天纔長齣皮下可及、但肉眼看不到的腫瘤,而接種control siRNA組,平均第9天可長齣肉眼可見的腫瘤;用裸鼠腫瘤模型觀察siRNA的體內抑瘤效果,質粒DNA註射後,對照組瘤體10.93mm3,空質粒對照組為11.13 mm3,而siRNA質粒轉染組為4.26 mm3(P＜0,01);HE染色顯示,對照組和空質粒組質粒DNA註射後,病竈充滿腫瘤細胞;而siRNA組質粒DNA註射後,病竈內有大量炎性細胞浸潤,壞死明顯,僅見少量腫瘤細胞;且siRNA明顯誘導荷瘤鼠肝癌細胞凋亡,其凋亡指數為(28.79±2.13)%,較鹽水對照組(9.54±1.89)%和空質粒治療組(10.24±2.06)%明顯升高(t=15.41,P＜0.01).結論 靶嚮MAT2A基因的siRNA誘導荷瘤鼠肝癌細胞凋亡,抑製肝癌細胞生長.
목적 탐토MAT2A소간우:RNA대하류서간암세포생장화세포조망적영향.방법 채용지질체전염법장MAT2A소간우RNA질립표체재체전염인간암세포계Bel-7402세포,건립지속전록소간우RNA적세포계,병장해세포계피하접충라서,관찰종류생장정황;위진일보관찰라서체내억류성,장피하접충은정표체소우우RNA적Bel-7402세포계적라서분위삼조:A、염수대조조,B、공질립대조조,C、siRNA치료조;우접충후제12천,매조동물행순화질립DNA류내주사,관찰종류대소;치료후2주,처사소유동물,취종류,측량대소;부분석사포매절편、HE염색,부분진행조망검측.결과 득도은정전염siRNA재체、병능지속표체siRNA적Bel-7402세포계,장은정건계적세포전대,지속표체siRNA세포계종류세포생장명현완만.피하접충건계적Bel-7402세포건립하류서모형,가이관찰도siRNA조종류생장완만,평균제13천재장출피하가급、단육안간불도적종류,이접충control siRNA조,평균제9천가장출육안가견적종류;용라서종류모형관찰siRNA적체내억류효과,질립DNA주사후,대조조류체10.93mm3,공질립대조조위11.13 mm3,이siRNA질립전염조위4.26 mm3(P＜0,01);HE염색현시,대조조화공질립조질립DNA주사후,병조충만종류세포;이siRNA조질립DNA주사후,병조내유대량염성세포침윤,배사명현,부견소량종류세포;차siRNA명현유도하류서간암세포조망,기조망지수위(28.79±2.13)%,교염수대조조(9.54±1.89)%화공질립치료조(10.24±2.06)%명현승고(t=15.41,P＜0.01).결론 파향MAT2A기인적siRNA유도하류서간암세포조망,억제간암세포생장.
