现代免疫学
現代免疫學
현대면역학
CURRENT IMMUNOLOGY
2006年
6期
459-464
,共6页
李丰耀%查庆兵%徐丽慧%迟晓云%贾仟涛%何贤辉%曾耀英
李豐耀%查慶兵%徐麗慧%遲曉雲%賈仟濤%何賢輝%曾耀英
리봉요%사경병%서려혜%지효운%가천도%하현휘%증요영
HLA-A*1101%四聚体%流式细胞术%巨细胞病毒
HLA-A*1101%四聚體%流式細胞術%巨細胞病毒
HLA-A*1101%사취체%류식세포술%거세포병독
为体外复性制备负载人巨细胞病毒(HCMV)pp65抗原肽的HLA-A*1101-GPI四聚体,研究优化HLA-A*1101重链与生物素化酶底物肽融合蛋白(HLA-A*1101-BSP)在大肠杆菌中的诱导表达的温度、时间和诱导剂IPTG浓度,并以抗HLA-A*0201抗血清进行免疫印迹鉴定HLA-A*1101-BSP的表达水平.将初步纯化的HLA-A*1101-BSP与β2-微球蛋白(β2m)和HCMV抗原肽pp6516-24(GPISGHVLK,简称GPI)一起利用稀释法进行重折叠复性,获得可溶性HLA-A*1101-GPI单体,经生物素化和纯化后,与Streptavidin-PE结合成四聚体.流式细胞仪分析显示HLA-A*1101-GPI四聚体具有与特异性细胞毒T细胞(CTL)的结合活性,表明成功获得可溶性HLA-A*1101-GPI四聚体,为研究HLA-A*1101限制性CTL的免疫应答打下基础.
為體外複性製備負載人巨細胞病毒(HCMV)pp65抗原肽的HLA-A*1101-GPI四聚體,研究優化HLA-A*1101重鏈與生物素化酶底物肽融閤蛋白(HLA-A*1101-BSP)在大腸桿菌中的誘導錶達的溫度、時間和誘導劑IPTG濃度,併以抗HLA-A*0201抗血清進行免疫印跡鑒定HLA-A*1101-BSP的錶達水平.將初步純化的HLA-A*1101-BSP與β2-微毬蛋白(β2m)和HCMV抗原肽pp6516-24(GPISGHVLK,簡稱GPI)一起利用稀釋法進行重摺疊複性,穫得可溶性HLA-A*1101-GPI單體,經生物素化和純化後,與Streptavidin-PE結閤成四聚體.流式細胞儀分析顯示HLA-A*1101-GPI四聚體具有與特異性細胞毒T細胞(CTL)的結閤活性,錶明成功穫得可溶性HLA-A*1101-GPI四聚體,為研究HLA-A*1101限製性CTL的免疫應答打下基礎.
위체외복성제비부재인거세포병독(HCMV)pp65항원태적HLA-A*1101-GPI사취체,연구우화HLA-A*1101중련여생물소화매저물태융합단백(HLA-A*1101-BSP)재대장간균중적유도표체적온도、시간화유도제IPTG농도,병이항HLA-A*0201항혈청진행면역인적감정HLA-A*1101-BSP적표체수평.장초보순화적HLA-A*1101-BSP여β2-미구단백(β2m)화HCMV항원태pp6516-24(GPISGHVLK,간칭GPI)일기이용희석법진행중절첩복성,획득가용성HLA-A*1101-GPI단체,경생물소화화순화후,여Streptavidin-PE결합성사취체.류식세포의분석현시HLA-A*1101-GPI사취체구유여특이성세포독T세포(CTL)적결합활성,표명성공획득가용성HLA-A*1101-GPI사취체,위연구HLA-A*1101한제성CTL적면역응답타하기출.
