CAJ | 학술논문

目的:评价4,6-联脒-2-苯基吲哚作为荧光示踪剂在标记超薄表皮片移植中的效果,为研究表皮片移植后细胞增殖和分化现象奠定基础.方法:实验于2005-01/05在解放军总医院第一附属医院全军创伤修复实验室完成.表皮片用中性蛋白酶分离自人环切术的包皮.①分离出的表皮片分为两组,空白对照组和实验组,实验组移植前用激发蓝色荧光的4,6-联脒-2-苯基吲哚标记皮片,空白对照组以磷酸盐缓冲液代替.②将表皮片随机移植于8只裸鼠32个创面,分别于移植4 d和7 d后取材.③用冰冻技术将皮片及其下组织切成厚度约为5μm的冰冻切片,选用罗丹明标记的广谱抗角蛋白抗体作为参照荧光,常规处理后在荧光显微镜观察皮片的染色效果.结果:8只裸鼠均进入结果分析.①皮片移植后的生长情况:空白对照组16个创面13个成活良好;4,6-联脒-2-苯基吲哚组16个创面14个成活良好.两组皮片成活率差异无显著性意义(χ2=1.34,P＞0.05).②皮片移植后的荧光显色结果:荧光显微镜下,4,6-联脒-2-苯基吲哚组可见圆点状的蓝色激发荧光;皮片激发的蓝色荧光与鼠源性组织的自发荧光有明显的对比度,在红色波长激发下可见皮片呈现均匀不一的红色荧光,合成荧光显色表明蓝色荧光多位于中央细胞核区域,红色荧光位于胞浆区域,荧光的对比度明显,且在皮片标记的8 d之内荧光未见明显的衰退现象.结论:用4,6-联脒-2-苯基吲哚示踪移植表皮片,效果良好且标记稳定,故4,6-联脒-2-苯基吲哚可以在表皮片移植的细胞增殖分化研究中加以运用.
목적:평개4,6-련미-2-분기신타작위형광시종제재표기초박표피편이식중적효과,위연구표피편이식후세포증식화분화현상전정기출.방법:실험우2005-01/05재해방군총의원제일부속의원전군창상수복실험실완성.표피편용중성단백매분리자인배절술적포피.①분리출적표피편분위량조,공백대조조화실험조,실험조이식전용격발람색형광적4,6-련미-2-분기신타표기피편,공백대조조이린산염완충액대체.②장표피편수궤이식우8지라서32개창면,분별우이식4 d화7 d후취재.③용빙동기술장피편급기하조직절성후도약위5μm적빙동절편,선용라단명표기적엄보항각단백항체작위삼조형광,상규처리후재형광현미경관찰피편적염색효과.결과:8지라서균진입결과분석.①피편이식후적생장정황:공백대조조16개창면13개성활량호;4,6-련미-2-분기신타조16개창면14개성활량호.량조피편성활솔차이무현저성의의(χ2=1.34,P＞0.05).②피편이식후적형광현색결과:형광현미경하,4,6-련미-2-분기신타조가견원점상적람색격발형광;피편격발적람색형광여서원성조직적자발형광유명현적대비도,재홍색파장격발하가견피편정현균균불일적홍색형광,합성형광현색표명람색형광다위우중앙세포핵구역,홍색형광위우포장구역,형광적대비도명현,차재피편표기적8 d지내형광미견명현적쇠퇴현상.결론:용4,6-련미-2-분기신타시종이식표피편,효과량호차표기은정,고4,6-련미-2-분기신타가이재표피편이식적세포증식분화연구중가이운용.