中国水产科学
中國水產科學
중국수산과학
Journal of Fishery Sciences of China
2008年
4期
550-558
,共9页
曲宪成%周正峰%崔严慧%刘颖%胡萍华%金一春%尚婧瑨
麯憲成%週正峰%崔嚴慧%劉穎%鬍萍華%金一春%尚婧瑨
곡헌성%주정봉%최엄혜%류영%호평화%금일춘%상청진
团头鲂%垂体糖蛋白激素α亚基%5'侧翼序列%启动子%表达载体
糰頭魴%垂體糖蛋白激素α亞基%5'側翼序列%啟動子%錶達載體
단두방%수체당단백격소α아기%5'측익서렬%계동자%표체재체
首先运用PCR-末端加尾法克隆了团头鲂(Megalobrama amblycephala)脑下垂体糖蛋白激素a亚基(Pituitary glycoprotein hormone α subunit,PGPH α)基因5'端侧翼序列:然后利用生物信息学理论对该序列进行了序列分析;最后在序列分析结果的基础上,构建了荧光素酶质粒表达载体.序列分析结果显示,克隆所得到的团头鲂PGPH α亚基基因5'端侧翼序列长1 399 bp;其序列中包含潜在的TATA盒、GC盒,以及ERE、TRE、CRE、PGBE等对:PGPH α亚基基因转录调控起重要作用的转录因子结合位点;启动子区域位于-40～10 bp处.利用PCR方法扩增得到了全长1 439 bp以及1120bp、532 bp、173 bp均包含转录起始位点下游40bp序列的缺失片段,并将其连接至pGl3-Basic报告基因载体,成功构建了团头鲂PGPα亚基基因5'端侧翼序列的表达载体,为进一步研究、分析其转录调控机制提供了基础.
首先運用PCR-末耑加尾法剋隆瞭糰頭魴(Megalobrama amblycephala)腦下垂體糖蛋白激素a亞基(Pituitary glycoprotein hormone α subunit,PGPH α)基因5'耑側翼序列:然後利用生物信息學理論對該序列進行瞭序列分析;最後在序列分析結果的基礎上,構建瞭熒光素酶質粒錶達載體.序列分析結果顯示,剋隆所得到的糰頭魴PGPH α亞基基因5'耑側翼序列長1 399 bp;其序列中包含潛在的TATA盒、GC盒,以及ERE、TRE、CRE、PGBE等對:PGPH α亞基基因轉錄調控起重要作用的轉錄因子結閤位點;啟動子區域位于-40～10 bp處.利用PCR方法擴增得到瞭全長1 439 bp以及1120bp、532 bp、173 bp均包含轉錄起始位點下遊40bp序列的缺失片段,併將其連接至pGl3-Basic報告基因載體,成功構建瞭糰頭魴PGPα亞基基因5'耑側翼序列的錶達載體,為進一步研究、分析其轉錄調控機製提供瞭基礎.
수선운용PCR-말단가미법극륭료단두방(Megalobrama amblycephala)뇌하수체당단백격소a아기(Pituitary glycoprotein hormone α subunit,PGPH α)기인5'단측익서렬:연후이용생물신식학이론대해서렬진행료서렬분석;최후재서렬분석결과적기출상,구건료형광소매질립표체재체.서렬분석결과현시,극륭소득도적단두방PGPH α아기기인5'단측익서렬장1 399 bp;기서렬중포함잠재적TATA합、GC합,이급ERE、TRE、CRE、PGBE등대:PGPH α아기기인전록조공기중요작용적전록인자결합위점;계동자구역위우-40～10 bp처.이용PCR방법확증득도료전장1 439 bp이급1120bp、532 bp、173 bp균포함전록기시위점하유40bp서렬적결실편단,병장기련접지pGl3-Basic보고기인재체,성공구건료단두방PGPα아기기인5'단측익서렬적표체재체,위진일보연구、분석기전록조공궤제제공료기출.
