广东医学
廣東醫學
엄동의학
GUNAGDONG MEDICAL JOURNAL
2009年
4期
512-514
,共3页
龚独辉%潘明新%姚坤厚%夏武政%康玉占%汪艳%高毅
龔獨輝%潘明新%姚坤厚%夏武政%康玉佔%汪豔%高毅
공독휘%반명신%요곤후%하무정%강옥점%왕염%고의
生物人工肝%人胎肝细胞%冷冻保存%苦参碱
生物人工肝%人胎肝細胞%冷凍保存%苦參堿
생물인공간%인태간세포%냉동보존%고삼감
目的 观察苦参碱对大规模低温冻存人胎肝细胞功能的影响.方法 改良肝细胞获取方法分离人胎肝细胞,经过1 h预培养后.将5种不同浓度(1×107,2.5×107,5×107,7.5×107,10×107·mL-1)的胎肝细胞以6 mg/L苦参碱+5%DMSO为冻存保护液置于骨髓干细胞冻存袋在液氮中冷冻保存1个月.1个月后复苏,进行活率、形态学及功能检测.结果 5种不同浓度的细胞冻存1个月后,细胞浓度为2.5×107·mL-1组复苏后存活率与其余四组相比差异有显著性(P<0.05),且明显高于其余四组.复苏后细胞存活率和24 h贴壁率分别为73%,69%,经过短期培养后,细胞功能逐渐恢复.结论 (1)苦参碱对低温冻存的人胎肝细胞有保护作用,与二甲基亚砜联用可降低DMSO的浓度;(2)以5%DMSO+6 mg/L苦参碱作为冻存保护刑,细胞浓度在2.5×107·mL-1冻存效果最佳.该大规模冻存方法基本上可以满足生物人工肝肝细胞应用的需求.
目的 觀察苦參堿對大規模低溫凍存人胎肝細胞功能的影響.方法 改良肝細胞穫取方法分離人胎肝細胞,經過1 h預培養後.將5種不同濃度(1×107,2.5×107,5×107,7.5×107,10×107·mL-1)的胎肝細胞以6 mg/L苦參堿+5%DMSO為凍存保護液置于骨髓榦細胞凍存袋在液氮中冷凍保存1箇月.1箇月後複囌,進行活率、形態學及功能檢測.結果 5種不同濃度的細胞凍存1箇月後,細胞濃度為2.5×107·mL-1組複囌後存活率與其餘四組相比差異有顯著性(P<0.05),且明顯高于其餘四組.複囌後細胞存活率和24 h貼壁率分彆為73%,69%,經過短期培養後,細胞功能逐漸恢複.結論 (1)苦參堿對低溫凍存的人胎肝細胞有保護作用,與二甲基亞砜聯用可降低DMSO的濃度;(2)以5%DMSO+6 mg/L苦參堿作為凍存保護刑,細胞濃度在2.5×107·mL-1凍存效果最佳.該大規模凍存方法基本上可以滿足生物人工肝肝細胞應用的需求.
목적 관찰고삼감대대규모저온동존인태간세포공능적영향.방법 개량간세포획취방법분리인태간세포,경과1 h예배양후.장5충불동농도(1×107,2.5×107,5×107,7.5×107,10×107·mL-1)적태간세포이6 mg/L고삼감+5%DMSO위동존보호액치우골수간세포동존대재액담중냉동보존1개월.1개월후복소,진행활솔、형태학급공능검측.결과 5충불동농도적세포동존1개월후,세포농도위2.5×107·mL-1조복소후존활솔여기여사조상비차이유현저성(P<0.05),차명현고우기여사조.복소후세포존활솔화24 h첩벽솔분별위73%,69%,경과단기배양후,세포공능축점회복.결론 (1)고삼감대저온동존적인태간세포유보호작용,여이갑기아풍련용가강저DMSO적농도;(2)이5%DMSO+6 mg/L고삼감작위동존보호형,세포농도재2.5×107·mL-1동존효과최가.해대규모동존방법기본상가이만족생물인공간간세포응용적수구.
