河南大学学报（医学版）
河南大學學報（醫學版）
하남대학학보（의학판）
JOURNAL OF HENAN UNIVERSITY (MEDICAL SCIENCE)
2010年
1期
37-39
,共3页
抗DR5单克隆抗体%单链抗体%真核表达
抗DR5單剋隆抗體%單鏈抗體%真覈錶達
항DR5단극륭항체%단련항체%진핵표체
目的:构建抗DR5单链抗体的真核表达载体,以实现真核表达.方法:RT-PCR法从分泌抗DR5抗体的杂交瘤细胞中合成第一链cDNA,用通用引物钓取单克隆抗体的轻、重链可变区基因.经测序和BLAST比对,证实为一株新的鼠源性抗体基因.利用overlapping PCR方法构建单链抗体真核表达载体pCMV-express-scFv,Lipofectamine2000法转染宿主细胞293T,72h后ELISA法检测细胞培养上清.检测抗体表达.结果:经序列鉴定和BLAST比对证实克隆的抗体轻、重链可变区基因为新鼠源抗体基因.ELISA实验结果显示抗体有效表达在细胞培养上清中.结论:成功得到抗体轻、重链可变区基因,实现了抗DR5单链抗体的真核表达,为进一步的研究和开发奠定了基础.
目的:構建抗DR5單鏈抗體的真覈錶達載體,以實現真覈錶達.方法:RT-PCR法從分泌抗DR5抗體的雜交瘤細胞中閤成第一鏈cDNA,用通用引物釣取單剋隆抗體的輕、重鏈可變區基因.經測序和BLAST比對,證實為一株新的鼠源性抗體基因.利用overlapping PCR方法構建單鏈抗體真覈錶達載體pCMV-express-scFv,Lipofectamine2000法轉染宿主細胞293T,72h後ELISA法檢測細胞培養上清.檢測抗體錶達.結果:經序列鑒定和BLAST比對證實剋隆的抗體輕、重鏈可變區基因為新鼠源抗體基因.ELISA實驗結果顯示抗體有效錶達在細胞培養上清中.結論:成功得到抗體輕、重鏈可變區基因,實現瞭抗DR5單鏈抗體的真覈錶達,為進一步的研究和開髮奠定瞭基礎.
목적:구건항DR5단련항체적진핵표체재체,이실현진핵표체.방법:RT-PCR법종분비항DR5항체적잡교류세포중합성제일련cDNA,용통용인물조취단극륭항체적경、중련가변구기인.경측서화BLAST비대,증실위일주신적서원성항체기인.이용overlapping PCR방법구건단련항체진핵표체재체pCMV-express-scFv,Lipofectamine2000법전염숙주세포293T,72h후ELISA법검측세포배양상청.검측항체표체.결과:경서렬감정화BLAST비대증실극륭적항체경、중련가변구기인위신서원항체기인.ELISA실험결과현시항체유효표체재세포배양상청중.결론:성공득도항체경、중련가변구기인,실현료항DR5단련항체적진핵표체,위진일보적연구화개발전정료기출.
