解剖学报
解剖學報
해부학보
ACTA ANATOMICA SINICA
2010年
6期
827-831
,共5页
吴红%胡楠%杨宇民%姚登兵%顾晓松
吳紅%鬍楠%楊宇民%姚登兵%顧曉鬆
오홍%호남%양우민%요등병%고효송
骨髓基质细胞%丝素%相容性%超微结构%免疫荧光%流式细胞术%犬
骨髓基質細胞%絲素%相容性%超微結構%免疫熒光%流式細胞術%犬
골수기질세포%사소%상용성%초미결구%면역형광%류식세포술%견
目的 探讨体外培养的犬骨髓基质细胞(BMSCs)与蚕丝丝素材料的生物相容性,寻找BMSCs组织工程化神经的支架材料.方法 通过差速贴壁法体外分离、培养犬骨髓基质细胞,与丝素共培养后,通过光镜(经免疫荧光染色)、扫描电镜观察细胞在丝素上黏附和生长情况.利用丝素浸出液培养BMSCs后,通过透射电镜观察细胞内部超微结构,用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测丝素、羟基磷灰石、有机锡浸出液和普通IMDM完全培养基培养细胞12、24、48、72h和7d的细胞活力,每组重复12次.流式细胞术检测丝素浸出液培养BMSCs的细胞周期及表型,实验重复3次.结果 通过光镜、扫描电镜观察,发现BMSCs 紧紧黏附于丝素材料,并沿着丝素纤维延伸,黏附于丝素纤维的细胞呈圆形、椭圆形及呈梭形.与普通IMDM完全培养基培养的细胞相比,透射电镜下可见丝素浸出液培养后的BMSCs内部结构未见异常;MTT检测丝素和羟基磷灰石浸出液对骨髓基质细胞的活力无显著性影响(P>0.05);流式细胞术检测丝素浸出液对骨髓基质细胞周期和表型无明显影响.结论 蚕丝丝素材料与犬BMSCs生物相容性好,且未见丝素对BMSCs有毒性作用,可作为BMSCs组织工程化神经的支架材料.
目的 探討體外培養的犬骨髓基質細胞(BMSCs)與蠶絲絲素材料的生物相容性,尋找BMSCs組織工程化神經的支架材料.方法 通過差速貼壁法體外分離、培養犬骨髓基質細胞,與絲素共培養後,通過光鏡(經免疫熒光染色)、掃描電鏡觀察細胞在絲素上黏附和生長情況.利用絲素浸齣液培養BMSCs後,通過透射電鏡觀察細胞內部超微結構,用四甲基偶氮唑鹽(MTT)法檢測絲素、羥基燐灰石、有機錫浸齣液和普通IMDM完全培養基培養細胞12、24、48、72h和7d的細胞活力,每組重複12次.流式細胞術檢測絲素浸齣液培養BMSCs的細胞週期及錶型,實驗重複3次.結果 通過光鏡、掃描電鏡觀察,髮現BMSCs 緊緊黏附于絲素材料,併沿著絲素纖維延伸,黏附于絲素纖維的細胞呈圓形、橢圓形及呈梭形.與普通IMDM完全培養基培養的細胞相比,透射電鏡下可見絲素浸齣液培養後的BMSCs內部結構未見異常;MTT檢測絲素和羥基燐灰石浸齣液對骨髓基質細胞的活力無顯著性影響(P>0.05);流式細胞術檢測絲素浸齣液對骨髓基質細胞週期和錶型無明顯影響.結論 蠶絲絲素材料與犬BMSCs生物相容性好,且未見絲素對BMSCs有毒性作用,可作為BMSCs組織工程化神經的支架材料.
목적 탐토체외배양적견골수기질세포(BMSCs)여잠사사소재료적생물상용성,심조BMSCs조직공정화신경적지가재료.방법 통과차속첩벽법체외분리、배양견골수기질세포,여사소공배양후,통과광경(경면역형광염색)、소묘전경관찰세포재사소상점부화생장정황.이용사소침출액배양BMSCs후,통과투사전경관찰세포내부초미결구,용사갑기우담서염(MTT)법검측사소、간기린회석、유궤석침출액화보통IMDM완전배양기배양세포12、24、48、72h화7d적세포활력,매조중복12차.류식세포술검측사소침출액배양BMSCs적세포주기급표형,실험중복3차.결과 통과광경、소묘전경관찰,발현BMSCs 긴긴점부우사소재료,병연착사소섬유연신,점부우사소섬유적세포정원형、타원형급정사형.여보통IMDM완전배양기배양적세포상비,투사전경하가견사소침출액배양후적BMSCs내부결구미견이상;MTT검측사소화간기린회석침출액대골수기질세포적활력무현저성영향(P>0.05);류식세포술검측사소침출액대골수기질세포주기화표형무명현영향.결론 잠사사소재료여견BMSCs생물상용성호,차미견사소대BMSCs유독성작용,가작위BMSCs조직공정화신경적지가재료.