CAJ | 학술논문

人IL-17A和IL-17F具有很高的同源性,在炎症性疾病、自身免疫性疾病和肿瘤中都发挥着重要的作用,是当前研究的热点.应用原核表达系统在大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达了人IL-17A和IL-17F;经培养条件的优化,未发现可溶性目的蛋白的表达,免疫印记分析显示,重组蛋白位于包涵体中;对包涵体进行洗涤、凝胶过滤层析纯化和柱上复性,获得重折叠的可溶性蛋白;随后用SDS-PAGE对蛋白样品进行了纯度分析、采用免疫印记和质谱的方法鉴定蛋白产物成分、用ME3T3-E1和RAW264.7两个细胞株对IL-17A、IL-17F的生物学活性进行测定.结果显示,柱上复性的方法制备的谊重组蛋白具有较高的纯度和活性.建立的重组人IL-17A和IL-17F的制备方法可为相关研究中细胞因子的大量应用提供参考.
인IL-17A화IL-17F구유흔고적동원성,재염증성질병、자신면역성질병화종류중도발휘착중요적작용,시당전연구적열점.응용원핵표체계통재대장간균BL21(DE3)중고효표체료인IL-17A화IL-17F;경배양조건적우화,미발현가용성목적단백적표체,면역인기분석현시,중조단백위우포함체중;대포함체진행세조、응효과려층석순화화주상복성,획득중절첩적가용성단백;수후용SDS-PAGE대단백양품진행료순도분석、채용면역인기화질보적방법감정단백산물성분、용ME3T3-E1화RAW264.7량개세포주대IL-17A、IL-17F적생물학활성진행측정.결과현시,주상복성적방법제비적의중조단백구유교고적순도화활성.건립적중조인IL-17A화IL-17F적제비방법가위상관연구중세포인자적대량응용제공삼고.