西南民族大学学报（自然科学版）
西南民族大學學報（自然科學版）
서남민족대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF SOUTHWEST NATIONALITIES COLLEGE·NATURAL SCIENCE EDITION
2011年
3期
401-404
,共4页
鸡%Hsp70%SMART技术%克隆%原核表达
鷄%Hsp70%SMART技術%剋隆%原覈錶達
계%Hsp70%SMART기술%극륭%원핵표체
热休克蛋白70基因(heat shock protein 70 gene.Hsp70gene)具有多种重要生理学功能.为进一步研究鸡Hsp70及其表达蛋白的生物学特性,设计一对特异性引物,并采用SMART技术富集鸡心肌细胞mRNA,RT-PCR扩增Hsp70基因的完整编码区,构建Hsp70原核表达载体,转化E.coli.BL21(DE3),IPTG诱导表达Hsp70重组蛋白结果显示,扩增片段为1905bp,包含有鸡Hsp70基因完整编码区与GenBank中鸡Hsp70基因的同源性为99.2%～99.8%.SDS-PAGE电泳显示,在92Kda处的蛋白表达量明显增多,Western blot试验证实表达产物能与抗Hsp70阳性血清发生反应,证实本研究扩增出了鸡Hsp70基因的完整编码区,原核表达得到了鸡Hsp70重组蛋白.为进一步研究鸡Hsp70的分子特征及其表达蛋白的生物学功能奠定了基础.
熱休剋蛋白70基因(heat shock protein 70 gene.Hsp70gene)具有多種重要生理學功能.為進一步研究鷄Hsp70及其錶達蛋白的生物學特性,設計一對特異性引物,併採用SMART技術富集鷄心肌細胞mRNA,RT-PCR擴增Hsp70基因的完整編碼區,構建Hsp70原覈錶達載體,轉化E.coli.BL21(DE3),IPTG誘導錶達Hsp70重組蛋白結果顯示,擴增片段為1905bp,包含有鷄Hsp70基因完整編碼區與GenBank中鷄Hsp70基因的同源性為99.2%～99.8%.SDS-PAGE電泳顯示,在92Kda處的蛋白錶達量明顯增多,Western blot試驗證實錶達產物能與抗Hsp70暘性血清髮生反應,證實本研究擴增齣瞭鷄Hsp70基因的完整編碼區,原覈錶達得到瞭鷄Hsp70重組蛋白.為進一步研究鷄Hsp70的分子特徵及其錶達蛋白的生物學功能奠定瞭基礎.
열휴극단백70기인(heat shock protein 70 gene.Hsp70gene)구유다충중요생이학공능.위진일보연구계Hsp70급기표체단백적생물학특성,설계일대특이성인물,병채용SMART기술부집계심기세포mRNA,RT-PCR확증Hsp70기인적완정편마구,구건Hsp70원핵표체재체,전화E.coli.BL21(DE3),IPTG유도표체Hsp70중조단백결과현시,확증편단위1905bp,포함유계Hsp70기인완정편마구여GenBank중계Hsp70기인적동원성위99.2%～99.8%.SDS-PAGE전영현시,재92Kda처적단백표체량명현증다,Western blot시험증실표체산물능여항Hsp70양성혈청발생반응,증실본연구확증출료계Hsp70기인적완정편마구,원핵표체득도료계Hsp70중조단백.위진일보연구계Hsp70적분자특정급기표체단백적생물학공능전정료기출.
