CAJ | 학술논문

目的观察野生型C3H/HeN小鼠和Toll样受体4(TLR4)基因缺陷型C3H/HeJ小鼠腹腔巨噬细胞在脂多糖(LPS)刺激下激活状态的差异,从体外途径探讨TLR4传导信号在前葡萄膜炎发病中的可能作用机制.设计实验研究.研究对象健康成年C3H/HeN和C3H/HeJ小鼠.方法常规提取两种小鼠腹腔巨噬细胞体外培养,按处理因素不同随机分六组:C3H/HeN小鼠LPS组、正常对照组、抗TLR4附单克隆抗体加LPS组、抗TLR4单克隆抗体组;C3H/HeJ小鼠LPS组、正常对照组.各组在不司处理后1h、3h、6h、12h、24h五个时间点通过免疫荧光组织化学染色进行观察.主要指标TLR4传导途径中关键分子TLR4、髓样分化因子88(MyD88)、核因子-кB(NF-кB)免疫荧光强度及表达位置差异.结果所有组TLR4均表达于细胞膜,MyD88表达于细胞质和细胞核.C3H/HeN小鼠LPS组和C3H/HeJ小鼠LPS组TLR4荧光强度比较,差异有统计学意义;余各组TLR4荧光强度两两比较,差异无统计学意义.C3H/HeN小鼠腹腔巨噬细胞LPS组随LPS刺激时间的延长,各观察时间点MyD88荧光强度逐渐减弱,总体差异有统计学意义;余各组各时间点MyD88荧光强度无明显变化.C3H/HeN小鼠正常对照组、抗TLR4单克隆抗体组,C3H/HeJ小鼠正常对照组腹腔巨噬细胞各时间点NF-кB均表达于胞质,C3H/HeN小鼠腹腔巨噬细胞LPS刺激1h后NF-кB表达于胞核,3h依旧表达于胞核,此后无法检测到NF-кB的表达.C3H/HeN小鼠抗TLR4单克隆抗体加LPS组、C3H/HeJ小鼠LPS组巨噬细胞经LPS刺激1h后NF-кB转移至胞膜,直至24h一直表达于胞膜.结论腹腔巨噬细胞TLR4传导途径中核因子的转位可能与前葡萄膜炎的发病有关,特异性阻断该途径或许为前葡萄膜炎的治疗提供新思路.
목적 관찰야생형C3H/HeN소서화Toll양수체4(TLR4)기인결함형C3H/HeJ소서복강거서세포재지다당(LPS)자격하격활상태적차이,종체외도경탐토TLR4전도신호재전포도막염발병중적가능작용궤제.설계실험연구.연구대상건강성년C3H/HeN화C3H/HeJ소서.방법 상규제취량충소서복강거서세포체외배양,안처리인소불동수궤분륙조:C3H/HeN소서LPS조、정상대조조、항TLR4부단극륭항체가LPS조、항TLR4단극륭항체조;C3H/HeJ소서LPS조、정상대조조.각조재불사처리후1h、3h、6h、12h、24h오개시간점통과면역형광조직화학염색진행관찰.주요지표TLR4전도도경중관건분자TLR4、수양분화인자88(MyD88)、핵인자-кB(NF-кB)면역형광강도급표체위치차이.결과 소유조TLR4균표체우세포막,MyD88표체우세포질화세포핵.C3H/HeN소서LPS조화C3H/HeJ소서LPS조TLR4형광강도비교,차이유통계학의의;여각조TLR4형광강도량량비교,차이무통계학의의.C3H/HeN소서복강거서세포LPS조수LPS자격시간적연장,각관찰시간점MyD88형광강도축점감약,총체차이유통계학의의;여각조각시간점MyD88형광강도무명현변화.C3H/HeN소서정상대조조、항TLR4단극륭항체조,C3H/HeJ소서정상대조조복강거서세포각시간점NF-кB균표체우포질,C3H/HeN소서복강거서세포LPS자격1h후NF-кB표체우포핵,3h의구표체우포핵,차후무법검측도NF-кB적표체.C3H/HeN소서항TLR4단극륭항체가LPS조、C3H/HeJ소서LPS조거서세포경LPS자격1h후NF-кB전이지포막,직지24h일직표체우포막.결론 복강거서세포TLR4전도도경중핵인자적전위가능여전포도막염적발병유관,특이성조단해도경혹허위전포도막염적치료제공신사로.