陕西医学杂志
陝西醫學雜誌
협서의학잡지
SHAANXI MEDICAL JOURNAL
2012年
6期
646-648,668
,共4页
李辉%郭剑%张艳%庞雅玲%李晓燕%吴贵福
李輝%郭劍%張豔%龐雅玲%李曉燕%吳貴福
리휘%곽검%장염%방아령%리효연%오귀복
微RNAs%成骨细胞%杂合子检测
微RNAs%成骨細胞%雜閤子檢測
미RNAs%성골세포%잡합자검측
目的:构建miR-3960的真核表达载体,并观察其对成骨细胞矿化的影响.方法:设计引物合成miR-3960的前体序列,将其克隆到真核表达载体pSilencer4.1-CMV puro中,构建成pSilencer4.1-miR-3960重组体.通过酶切及测序证实构建是否成功.随后将miR-3960表达载体转染小鼠基质细胞ST2,Northern blot检测miR-3960表达水平.用BMP-2诱导ST2细胞向成骨细胞分化,通过检测钙沉积量来观察对成骨细胞矿化的影响.结果:pSilencer4.1-miR-3960真核表达载体经酶切及测序鉴定正确.pSilencer4.1-miR-3960转染ST2细胞后,能有效表达miR-3960.经BMP-2诱导分化5d后,稳定转染组钙沉积量较对照组显著增加.结论:成功构建了真核表达载体pSilencer4.1-miR-3960,转染ST2细胞后能有效表达.miR-3960可以促进成骨细胞矿化.
目的:構建miR-3960的真覈錶達載體,併觀察其對成骨細胞礦化的影響.方法:設計引物閤成miR-3960的前體序列,將其剋隆到真覈錶達載體pSilencer4.1-CMV puro中,構建成pSilencer4.1-miR-3960重組體.通過酶切及測序證實構建是否成功.隨後將miR-3960錶達載體轉染小鼠基質細胞ST2,Northern blot檢測miR-3960錶達水平.用BMP-2誘導ST2細胞嚮成骨細胞分化,通過檢測鈣沉積量來觀察對成骨細胞礦化的影響.結果:pSilencer4.1-miR-3960真覈錶達載體經酶切及測序鑒定正確.pSilencer4.1-miR-3960轉染ST2細胞後,能有效錶達miR-3960.經BMP-2誘導分化5d後,穩定轉染組鈣沉積量較對照組顯著增加.結論:成功構建瞭真覈錶達載體pSilencer4.1-miR-3960,轉染ST2細胞後能有效錶達.miR-3960可以促進成骨細胞礦化.
목적:구건miR-3960적진핵표체재체,병관찰기대성골세포광화적영향.방법:설계인물합성miR-3960적전체서렬,장기극륭도진핵표체재체pSilencer4.1-CMV puro중,구건성pSilencer4.1-miR-3960중조체.통과매절급측서증실구건시부성공.수후장miR-3960표체재체전염소서기질세포ST2,Northern blot검측miR-3960표체수평.용BMP-2유도ST2세포향성골세포분화,통과검측개침적량래관찰대성골세포광화적영향.결과:pSilencer4.1-miR-3960진핵표체재체경매절급측서감정정학.pSilencer4.1-miR-3960전염ST2세포후,능유효표체miR-3960.경BMP-2유도분화5d후,은정전염조개침적량교대조조현저증가.결론:성공구건료진핵표체재체pSilencer4.1-miR-3960,전염ST2세포후능유효표체.miR-3960가이촉진성골세포광화.
