CAJ | 학술논문

目的以遗传性视网膜变性RCS大鼠为模型,探讨视网膜下间隙移植表达睫状神经营养因子(CNTF)的人胚肺(HFL)成纤维细胞治疗视网膜变性的可行性.方法通过脂质体将编码CNTF的表达质粒转入HFL成纤维细胞、MTX及ELISA筛选高水平表达CNTF的细胞克隆.手术显微镜直视下经角膜缘后1 mm 注射5 μl 含1×105个高水平表达CNTF的HFL成纤维细胞至4～5周龄RCS大鼠右眼视网膜下间隙,左眼不手术或注射PBS作为对照.分别于移植术后2、4、6、8、10、12及15周随机取1只鼠摘除眼球作光镜观察,随机取2只鼠摘除眼球作电镜观察.结果稳定转染CNTF的HFL成纤维细胞能高水平表达CNTF (91 046.15 pg/ml),7只经光镜观察的移植眼中的4只,其视网膜外颗粒层明显较对照眼厚,保存的光感受器数量明显较对照眼多(P≤0.002).14只经电镜观察的移植眼中的10只,视网膜外颗粒层光感受器凋亡明显较对照眼少.在光感受器与视网膜色素上皮间堆积的盘膜碎片亦较少.宿主视网膜色素上皮细胞的形态保存较好,并可见吞噬小体.结论经过CNTF基因修饰的HFL成纤维细胞视网膜下间隙移植能够延缓RCS大鼠视网膜光感受器变性.
목적이유전성시망막변성RCS대서위모형,탐토시망막하간극이식표체첩상신경영양인자(CNTF)적인배폐(HFL)성섬유세포치료시망막변성적가행성.방법통과지질체장편마CNTF적표체질립전입HFL성섬유세포、MTX급ELISA사선고수평표체CNTF적세포극륭.수술현미경직시하경각막연후1 mm 주사5 μl 함1×105개고수평표체CNTF적HFL성섬유세포지4～5주령RCS대서우안시망막하간극,좌안불수술혹주사PBS작위대조.분별우이식술후2、4、6、8、10、12급15주수궤취1지서적제안구작광경관찰,수궤취2지서적제안구작전경관찰.결과은정전염CNTF적HFL성섬유세포능고수평표체CNTF (91 046.15 pg/ml),7지경광경관찰적이식안중적4지,기시망막외과립층명현교대조안후,보존적광감수기수량명현교대조안다(P≤0.002).14지경전경관찰적이식안중적10지,시망막외과립층광감수기조망명현교대조안소.재광감수기여시망막색소상피간퇴적적반막쇄편역교소.숙주시망막색소상피세포적형태보존교호,병가견탄서소체.결론경과CNTF기인수식적HFL성섬유세포시망막하간극이식능구연완RCS대서시망막광감수기변성.