微生物学报
微生物學報
미생물학보
ACTA MICROBIOLOGICA SINICA
2006年
5期
709-713
,共5页
假单胞菌M18%rpoS%lacZ%插入突变%融合%鉴定
假單胞菌M18%rpoS%lacZ%插入突變%融閤%鑒定
가단포균M18%rpoS%lacZ%삽입돌변%융합%감정
通过菌落原位杂交和Southern杂交,从假单胞菌M18基因组文库中克隆了rpoS基因及相邻序列.为了深入研究影响rpoS基因表达的调控因素,运用同源重组技术,将无启动子β-半乳糖苷酶基因(-′lacZ)插入并融合于rpoS基因中,构建了假单胞菌M18 rpoS基因突变株M18SZ.Miller法测定显示,突变株M18SZ的β-半乳糖苷酶可高达480U,而野生株检测不到β-半乳糖苷酶活性.表明,突变株中的rpoS基因与无启动子β-半乳糖苷酶基因已融合并且表达.在KMB培养基中生长量测定(OD600)的结果表明,突变株与野生株生长存在显著差异.
通過菌落原位雜交和Southern雜交,從假單胞菌M18基因組文庫中剋隆瞭rpoS基因及相鄰序列.為瞭深入研究影響rpoS基因錶達的調控因素,運用同源重組技術,將無啟動子β-半乳糖苷酶基因(-′lacZ)插入併融閤于rpoS基因中,構建瞭假單胞菌M18 rpoS基因突變株M18SZ.Miller法測定顯示,突變株M18SZ的β-半乳糖苷酶可高達480U,而野生株檢測不到β-半乳糖苷酶活性.錶明,突變株中的rpoS基因與無啟動子β-半乳糖苷酶基因已融閤併且錶達.在KMB培養基中生長量測定(OD600)的結果錶明,突變株與野生株生長存在顯著差異.
통과균락원위잡교화Southern잡교,종가단포균M18기인조문고중극륭료rpoS기인급상린서렬.위료심입연구영향rpoS기인표체적조공인소,운용동원중조기술,장무계동자β-반유당감매기인(-′lacZ)삽입병융합우rpoS기인중,구건료가단포균M18 rpoS기인돌변주M18SZ.Miller법측정현시,돌변주M18SZ적β-반유당감매가고체480U,이야생주검측불도β-반유당감매활성.표명,돌변주중적rpoS기인여무계동자β-반유당감매기인이융합병차표체.재KMB배양기중생장량측정(OD600)적결과표명,돌변주여야생주생장존재현저차이.
