日本血吸虫信号转导蛋白Sjwnt-4基因的克隆、表达及功能分析
일본혈흡충신호전도단백Sjwnt-4기인적극륭、표체급공능분석
Cloning,Expression and Characterization of a Gene Encoding Signal Transduction Protein Wnt4 of Schistosoma japonicum
  • 万方数据
    生物工程学报 생물공정학보
    CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY
    2007年 3期 392-397 ,共6页

    陶丽红%姚利晓%傅志强%冯新港%刘金明%石耀军%苑纯秀%蔡幼民%林矫矫

    도려홍%요리효%부지강%풍신항%류금명%석요군%원순수%채유민%림교교

    日本血吸虫%信号转导%Wnt4%发育%差异表达 日本血吸蟲%信號轉導%Wnt4%髮育%差異錶達
    일본혈흡충%신호전도%Wnt4%발육%차이표체
    由Wnt基因家族产物与其它相关基因产物构成的Wnt信号通路,是细胞发育和生长调节的一个关键途径,对动物的发育特别是生殖系统的发育起重要的调节作用.在人类和小鼠中,Wnt4蛋白是性腺分化过程中主要调节因子,在胚胎发育中起着关键作用.利用RACE技术从日本血吸虫19d童虫中首次扩增到一个Wnt家族基因,序列分析表明该基因的完整编码框含1311bp.编码436个氨基酸,理论分子量49.6kD.同源性分析结果表明,该基因的氨基酸序列具有典型Wnt家族蛋白特征,与日本三角涡虫、人Wnt4的氨基酸序列相似性分别达43%、37%,推测为血吸虫的Wnt4基因,命名为Sjwnt4(GenBank登陆号DQ643829).实时定量PCR分析显示该基因在14d童虫、19d童虫、31d虫体、44d雌虫及44d雄虫中均有表达,其中19d童虫中的表达量明显高于其它发育阶段,44d雌虫中的表达量明显高于雄虫.构建了该基因的原核表达裁体pGEX-4T-2-Sjwnt4,应用大肠杆菌系统进行了表达,表达蛋白以包涵体形式存在,Western印迹显示表达产物能被日本血吸虫成虫粗抗原免疫血清所识别.Sjwnt4基因及其表达产物的获得,为探索Wnt信号通路对血吸虫发育、生殖的调节提供了重要基础.
    유Wnt기인가족산물여기타상관기인산물구성적Wnt신호통로,시세포발육화생장조절적일개관건도경,대동물적발육특별시생식계통적발육기중요적조절작용.재인류화소서중,Wnt4단백시성선분화과정중주요조절인자,재배태발육중기착관건작용.이용RACE기술종일본혈흡충19d동충중수차확증도일개Wnt가족기인,서렬분석표명해기인적완정편마광함1311bp.편마436개안기산,이론분자량49.6kD.동원성분석결과표명,해기인적안기산서렬구유전형Wnt가족단백특정,여일본삼각와충、인Wnt4적안기산서렬상사성분별체43%、37%,추측위혈흡충적Wnt4기인,명명위Sjwnt4(GenBank등륙호DQ643829).실시정량PCR분석현시해기인재14d동충、19d동충、31d충체、44d자충급44d웅충중균유표체,기중19d동충중적표체량명현고우기타발육계단,44d자충중적표체량명현고우웅충.구건료해기인적원핵표체재체pGEX-4T-2-Sjwnt4,응용대장간균계통진행료표체,표체단백이포함체형식존재,Western인적현시표체산물능피일본혈흡충성충조항원면역혈청소식별.Sjwnt4기인급기표체산물적획득,위탐색Wnt신호통로대혈흡충발육、생식적조절제공료중요기출.
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