真核表达载体pcDNA3-CTLA4Ig转染小鼠对移植胰岛功能的影响
진핵표체재체pcDNA3-CTLA4Ig전염소서대이식이도공능적영향
Preventive effect of pcDNA3-CTLA4Ig plasmid transfection on islet allograft rejection in mice
  • 万方数据
    世界华人消化杂志 세계화인소화잡지
    WORLD CHINESE JOURNAL OF DIGESTOLOGY
    2007年 14期 1596-1601 ,共6页

    赵国华%孙宏治%钟鑫平%张金祥%许国岩%赵宁%程颖%张佳林%刘永锋

    조국화%손굉치%종흠평%장금상%허국암%조저%정영%장가림%류영봉

    胰岛移植%排斥反应%共刺激信号%B7/CD28 胰島移植%排斥反應%共刺激信號%B7/CD28
    이도이식%배척반응%공자격신호%B7/CD28
    目的:探讨真核表达载体pcDNA3-CTLA4Ig转染受体小鼠肌细胞后对胰岛移植后排斥反应的影响.方法:受体C57BL/6小鼠随机分为对照组、空白转染组和实验组(转染pcDNA3-CTLA4Ig).Western blot检测受体小鼠血清CTLA4-Ig表达,观察移植物存活时间,术后7 d取受体肾脏做HE染色及胰岛素免疫组化染色,采用微量全血3H-胸腺嘧啶掺入法检测单个核细胞在刀豆蛋白A刺激下的增殖程度,流式细胞仪检测外周血T细胞亚群表达情况.结果:受体小鼠转染5 d后,Western blot检测到血清内有CTLA4Ig表达,转染效率为27.50%;实验组小鼠血糖维持正常时间明显延长(P＜0.05);术后7 d,转染组单个核细胞在刀豆蛋白刺激下的增殖程度明显降低(P＜0.05),CD4+、CD8+T淋巴细胞表达与对照组和空白转染组相比有显著差异差异(CD4+:14.38%±0.84% vs 20.56%±0.68%,21.04%±1.14%,P＜0.05;CD8+:14.77%±0.92% vs 24.63%±1.30%,23.84%±1.21%,P＜0.05),小鼠肾被膜下胰岛素免疫组化染色强度明显增高.结论:利用脂质体法可将pcDNA3-CTLA4Ig转染到活体小鼠肌细胞内并在小鼠体内表达CTLA4Ig,从而阻断B7/CD28共刺激信号途径,抑制胰岛移植术后排斥反应.
    목적:탐토진핵표체재체pcDNA3-CTLA4Ig전염수체소서기세포후대이도이식후배척반응적영향.방법:수체C57BL/6소서수궤분위대조조、공백전염조화실험조(전염pcDNA3-CTLA4Ig).Western blot검측수체소서혈청CTLA4-Ig표체,관찰이식물존활시간,술후7 d취수체신장주HE염색급이도소면역조화염색,채용미량전혈3H-흉선밀정참입법검측단개핵세포재도두단백A자격하적증식정도,류식세포의검측외주혈T세포아군표체정황.결과:수체소서전염5 d후,Western blot검측도혈청내유CTLA4Ig표체,전염효솔위27.50%;실험조소서혈당유지정상시간명현연장(P＜0.05);술후7 d,전염조단개핵세포재도두단백자격하적증식정도명현강저(P＜0.05),CD4+、CD8+T림파세포표체여대조조화공백전염조상비유현저차이차이(CD4+:14.38%±0.84% vs 20.56%±0.68%,21.04%±1.14%,P＜0.05;CD8+:14.77%±0.92% vs 24.63%±1.30%,23.84%±1.21%,P＜0.05),소서신피막하이도소면역조화염색강도명현증고.결론:이용지질체법가장pcDNA3-CTLA4Ig전염도활체소서기세포내병재소서체내표체CTLA4Ig,종이조단B7/CD28공자격신호도경,억제이도이식술후배척반응.
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