核农学报
覈農學報
핵농학보
ACTA AGRICULTURAE NUCLEATAE SINICA
2008年
2期
136-140
,共5页
蔡诚%吴大强%纵方%项艳
蔡誠%吳大彊%縱方%項豔
채성%오대강%종방%항염
杨树%正交设计%遗传转化%农杆菌
楊樹%正交設計%遺傳轉化%農桿菌
양수%정교설계%유전전화%농간균
本试验以建立的南林95杨高频再生体系为基础,利用正交试验设计,通过GUS组织染色分析法研究了预培养时间、菌液浓度、AS浓度、侵染时间和共培养时间5个因素在4个水平上对南林95杨遗传转化的影响,并探讨了南林95杨转化中添加卡那霉素(Kanamycin)的适宜浓度.结果表明:外植体预培养7d,在含乙酰丁香酮AS 200μmol/L、菌液浓度OD值为0.6的农杆菌液中侵染20min,共培养3d为最佳遗传转化体系,适宜的卡那霉素筛选浓度为50mg/L;经GUS染色检测和PCR分析表明,GUS基因已初步整合进南林95杨基因组中.
本試驗以建立的南林95楊高頻再生體繫為基礎,利用正交試驗設計,通過GUS組織染色分析法研究瞭預培養時間、菌液濃度、AS濃度、侵染時間和共培養時間5箇因素在4箇水平上對南林95楊遺傳轉化的影響,併探討瞭南林95楊轉化中添加卡那黴素(Kanamycin)的適宜濃度.結果錶明:外植體預培養7d,在含乙酰丁香酮AS 200μmol/L、菌液濃度OD值為0.6的農桿菌液中侵染20min,共培養3d為最佳遺傳轉化體繫,適宜的卡那黴素篩選濃度為50mg/L;經GUS染色檢測和PCR分析錶明,GUS基因已初步整閤進南林95楊基因組中.
본시험이건립적남림95양고빈재생체계위기출,이용정교시험설계,통과GUS조직염색분석법연구료예배양시간、균액농도、AS농도、침염시간화공배양시간5개인소재4개수평상대남림95양유전전화적영향,병탐토료남림95양전화중첨가잡나매소(Kanamycin)적괄의농도.결과표명:외식체예배양7d,재함을선정향동AS 200μmol/L、균액농도OD치위0.6적농간균액중침염20min,공배양3d위최가유전전화체계,괄의적잡나매소사선농도위50mg/L;경GUS염색검측화PCR분석표명,GUS기인이초보정합진남림95양기인조중.
