CAJ | 학술논문

为了提高流感病毒血凝素(HA)基因的表达量及其免疫原性,按照哺乳动物偏爱密码子将A/Goose/HLJ/QFY/04(H5N1)流感病毒的血凝素基因进行优化改造,然后插入到真核表达载体pCI-neo中,构建了真核表达质粒pCI-opti-HA.将此质粒和含野生HA基因的真核表达质粒pCI-wt-HA分别转染Vero或293T细胞,通过免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)和蛋白免疫印迹(WB)实验比较HA蛋白的表达量.将两种重组质粒免疫Balb/c小鼠,比较两者诱导的抗体产生水平.三次免疫后两周用强毒攻击,通过体温和体重变化评价两种重组质粒的免疫保护效果.IP-MA和WB实验结果表明:密码子优化后,HA蛋白在哺乳动物细胞中的表达水平显著提高.酶联免疫吸附实验(ELISA)结果表明:小鼠免疫后密码子优化的重组质粒诱导的特异性抗体效价较高.攻毒试验结果表明:两种重组质粒均能够提供较好的保护.
위료제고류감병독혈응소(HA)기인적표체량급기면역원성,안조포유동물편애밀마자장A/Goose/HLJ/QFY/04(H5N1)류감병독적혈응소기인진행우화개조,연후삽입도진핵표체재체pCI-neo중,구건료진핵표체질립pCI-opti-HA.장차질립화함야생HA기인적진핵표체질립pCI-wt-HA분별전염Vero혹293T세포,통과면역과양화물매단층세포시험(IPMA)화단백면역인적(WB)실험비교HA단백적표체량.장량충중조질립면역Balb/c소서,비교량자유도적항체산생수평.삼차면역후량주용강독공격,통과체온화체중변화평개량충중조질립적면역보호효과.IP-MA화WB실험결과표명:밀마자우화후,HA단백재포유동물세포중적표체수평현저제고.매련면역흡부실험(ELISA)결과표명:소서면역후밀마자우화적중조질립유도적특이성항체효개교고.공독시험결과표명:량충중조질립균능구제공교호적보호.