中国组织工程研究与临床康复
中國組織工程研究與臨床康複
중국조직공정연구여림상강복
JOURNAL OF CLINICAL REHABILITATIVE TISSUE ENGINEERING RESEARCH
2011年
1期
96-99
,共4页
朱飞滨%刘德伍%张红艳%彭燕%钟清玲%李勇铁
硃飛濱%劉德伍%張紅豔%彭燕%鐘清玲%李勇鐵
주비빈%류덕오%장홍염%팽연%종청령%리용철
表皮干细胞%糖尿病%大鼠%体外培养%创面愈合
錶皮榦細胞%糖尿病%大鼠%體外培養%創麵愈閤
표피간세포%당뇨병%대서%체외배양%창면유합
背景:表皮干细胞作为皮肤组织特异性干细胞,在创面修复中发挥关键作用.但有关糖尿病皮肤来源的表皮干细胞体外分离培养及生物特性研究较少.目的:探索糖尿病大鼠表皮干细胞体外分离培养的方法及其生物特性,为糖尿病难愈创面的防治及机制研究提供实验依据.方法:SD大鼠随机分成糖尿病组和正常对照组.糖尿病组采用一次性腹腔注射链脲佐菌素制备糖尿病大鼠模型,正常对照组不作处理.分别取成模糖尿病和正常大鼠背部全层皮肤,采用酶消化联合Ⅳ型胶原黏附法分离培养大鼠表皮干细胞.倒置相差显微镜下观察细胞形态变化和细胞克隆形成,细胞计数绘制生长曲线,计算克隆形成率,免疫细胞化学染色和图像分析软件鉴定K19、a1-integrin阳性表达和测定阳性细胞的积分吸光度(IA)值.结果与结论:糖尿病组大鼠表皮干细胞原代贴壁数量较少,其克隆形成率明显低于正常对照组(P < 0.01).表皮干细胞的K19、a1-integrin均呈阳性表达,糖尿病组阳性细胞的IA值均低于正常对照组(P < 0.01).结果提示,运用酶消化联合Ⅳ型胶原黏附法可以实现糖尿病大鼠表皮干细胞的体外分离培养;糖尿病大鼠表皮干细胞体外增殖能力较正常皮肤增殖能力弱,这可能是导致糖尿病创面难愈合的重要因素之一.
揹景:錶皮榦細胞作為皮膚組織特異性榦細胞,在創麵脩複中髮揮關鍵作用.但有關糖尿病皮膚來源的錶皮榦細胞體外分離培養及生物特性研究較少.目的:探索糖尿病大鼠錶皮榦細胞體外分離培養的方法及其生物特性,為糖尿病難愈創麵的防治及機製研究提供實驗依據.方法:SD大鼠隨機分成糖尿病組和正常對照組.糖尿病組採用一次性腹腔註射鏈脲佐菌素製備糖尿病大鼠模型,正常對照組不作處理.分彆取成模糖尿病和正常大鼠揹部全層皮膚,採用酶消化聯閤Ⅳ型膠原黏附法分離培養大鼠錶皮榦細胞.倒置相差顯微鏡下觀察細胞形態變化和細胞剋隆形成,細胞計數繪製生長麯線,計算剋隆形成率,免疫細胞化學染色和圖像分析軟件鑒定K19、a1-integrin暘性錶達和測定暘性細胞的積分吸光度(IA)值.結果與結論:糖尿病組大鼠錶皮榦細胞原代貼壁數量較少,其剋隆形成率明顯低于正常對照組(P < 0.01).錶皮榦細胞的K19、a1-integrin均呈暘性錶達,糖尿病組暘性細胞的IA值均低于正常對照組(P < 0.01).結果提示,運用酶消化聯閤Ⅳ型膠原黏附法可以實現糖尿病大鼠錶皮榦細胞的體外分離培養;糖尿病大鼠錶皮榦細胞體外增殖能力較正常皮膚增殖能力弱,這可能是導緻糖尿病創麵難愈閤的重要因素之一.
배경:표피간세포작위피부조직특이성간세포,재창면수복중발휘관건작용.단유관당뇨병피부래원적표피간세포체외분리배양급생물특성연구교소.목적:탐색당뇨병대서표피간세포체외분리배양적방법급기생물특성,위당뇨병난유창면적방치급궤제연구제공실험의거.방법:SD대서수궤분성당뇨병조화정상대조조.당뇨병조채용일차성복강주사련뇨좌균소제비당뇨병대서모형,정상대조조불작처리.분별취성모당뇨병화정상대서배부전층피부,채용매소화연합Ⅳ형효원점부법분리배양대서표피간세포.도치상차현미경하관찰세포형태변화화세포극륭형성,세포계수회제생장곡선,계산극륭형성솔,면역세포화학염색화도상분석연건감정K19、a1-integrin양성표체화측정양성세포적적분흡광도(IA)치.결과여결론:당뇨병조대서표피간세포원대첩벽수량교소,기극륭형성솔명현저우정상대조조(P < 0.01).표피간세포적K19、a1-integrin균정양성표체,당뇨병조양성세포적IA치균저우정상대조조(P < 0.01).결과제시,운용매소화연합Ⅳ형효원점부법가이실현당뇨병대서표피간세포적체외분리배양;당뇨병대서표피간세포체외증식능력교정상피부증식능력약,저가능시도치당뇨병창면난유합적중요인소지일.