天津医药
天津醫藥
천진의약
TIANJIN MEDICAL JOURNAL
2011年
2期
97-100
,共4页
付晓%朱梦瑜%高星杰%钱宝鑫%王保亚%赵虹%葛林%杨洁
付曉%硃夢瑜%高星傑%錢寶鑫%王保亞%趙虹%葛林%楊潔
부효%주몽유%고성걸%전보흠%왕보아%조홍%갈림%양길
质粒%遗传载体%发光蛋白质类%重组融合蛋白质类%转染%HeLa细胞%人类Tudor-SN蛋白
質粒%遺傳載體%髮光蛋白質類%重組融閤蛋白質類%轉染%HeLa細胞%人類Tudor-SN蛋白
질립%유전재체%발광단백질류%중조융합단백질류%전염%HeLa세포%인류Tudor-SN단백
目的:将人类Tudor-SN蛋白SN(1～4)基因片段分别定向连入pERFP-C1质粒,使Todor-SN蛋白SN各功能片段与红色荧光蛋白在HeLa细胞内融合表达.方法:以重组质粒pSG5-Tudor-SN-flag为模板,PCR法扩增出目的基因,利用EcoR Ⅰ和BamH Ⅰ双酶切法将目的片段连接到pERFP-C1载体上,再将构建成功的pERFP-C1-Tu-dor-SN-SN(1～4)重组质粒转染入HeLa细胞内,在荧光显微镜下观察红色荧光蛋白的表达.结果:以单/双酶切及基因测序法鉴定构建的重组质粒均无误,荧光显微镜下观察到红色融合蛋白的表达.结论:重组pERFP-C1-hTu-dor-SN-SN(1～4)质粒构建及表达成功.
目的:將人類Tudor-SN蛋白SN(1～4)基因片段分彆定嚮連入pERFP-C1質粒,使Todor-SN蛋白SN各功能片段與紅色熒光蛋白在HeLa細胞內融閤錶達.方法:以重組質粒pSG5-Tudor-SN-flag為模闆,PCR法擴增齣目的基因,利用EcoR Ⅰ和BamH Ⅰ雙酶切法將目的片段連接到pERFP-C1載體上,再將構建成功的pERFP-C1-Tu-dor-SN-SN(1～4)重組質粒轉染入HeLa細胞內,在熒光顯微鏡下觀察紅色熒光蛋白的錶達.結果:以單/雙酶切及基因測序法鑒定構建的重組質粒均無誤,熒光顯微鏡下觀察到紅色融閤蛋白的錶達.結論:重組pERFP-C1-hTu-dor-SN-SN(1～4)質粒構建及錶達成功.
목적:장인류Tudor-SN단백SN(1～4)기인편단분별정향련입pERFP-C1질립,사Todor-SN단백SN각공능편단여홍색형광단백재HeLa세포내융합표체.방법:이중조질립pSG5-Tudor-SN-flag위모판,PCR법확증출목적기인,이용EcoR Ⅰ화BamH Ⅰ쌍매절법장목적편단련접도pERFP-C1재체상,재장구건성공적pERFP-C1-Tu-dor-SN-SN(1～4)중조질립전염입HeLa세포내,재형광현미경하관찰홍색형광단백적표체.결과:이단/쌍매절급기인측서법감정구건적중조질립균무오,형광현미경하관찰도홍색융합단백적표체.결론:중조pERFP-C1-hTu-dor-SN-SN(1～4)질립구건급표체성공.
