南昌大学学报(医学版)
南昌大學學報(醫學版)
남창대학학보(의학판)
ACTA ACADEMIAE MEDICINAE JIANGXI
2011年
8期
52-56,59
,共6页
精原干细胞%原癌基因A-myb%动物,实验%大鼠
精原榦細胞%原癌基因A-myb%動物,實驗%大鼠
정원간세포%원암기인A-myb%동물,실험%대서
目的 研究原癌基因A-myb在体外培养的9日龄大鼠精原干细胞活性中的作用.方法 用不连续密度的Percoll液结合差速贴壁方法分离和纯化精原干细胞;用RT-PCR检测A-myb mRNA的表达;用Western blot检测A-myb表达产物A-myb的表达;用MTT比色法观察反义A-myb脱氧寡核苷酸(oligodeoxynucleotides,ODNs)对精原干细胞作用的量效及时效关系.结果 分离提取的细胞基本上为精原干细胞.与空白对照组相比,10 μmol·L-1反义A-myb ODNs作用48 h后精原干细胞内A-myb mRNA表达下降了47.8% (P<0.05),A-myb蛋白下降了51.7%(P<0.05).5、10、20μmol·L-1反义A-myb ODNs组与0μmol·L-1组在作用细胞48 h后相比,精原干细胞的活性分别下降11.8% (P<0.05)、50.1% (P<0.01)、53.8% (P<0.01).与空白对照组相比,10 μmol·L-1反义A-myb ODNs组作用12、24、48、72 h后精原干细胞活性分别下降18.8% (P<0.05)、30.0%(P<0.01)、38.6% (P<0.01)、41.0%(P<0.01),而正义A-myb ODNs组和空白对照组相比无明显差异.结论 原癌基因A-myb可调节大鼠精原干细胞的活性.
目的 研究原癌基因A-myb在體外培養的9日齡大鼠精原榦細胞活性中的作用.方法 用不連續密度的Percoll液結閤差速貼壁方法分離和純化精原榦細胞;用RT-PCR檢測A-myb mRNA的錶達;用Western blot檢測A-myb錶達產物A-myb的錶達;用MTT比色法觀察反義A-myb脫氧寡覈苷痠(oligodeoxynucleotides,ODNs)對精原榦細胞作用的量效及時效關繫.結果 分離提取的細胞基本上為精原榦細胞.與空白對照組相比,10 μmol·L-1反義A-myb ODNs作用48 h後精原榦細胞內A-myb mRNA錶達下降瞭47.8% (P<0.05),A-myb蛋白下降瞭51.7%(P<0.05).5、10、20μmol·L-1反義A-myb ODNs組與0μmol·L-1組在作用細胞48 h後相比,精原榦細胞的活性分彆下降11.8% (P<0.05)、50.1% (P<0.01)、53.8% (P<0.01).與空白對照組相比,10 μmol·L-1反義A-myb ODNs組作用12、24、48、72 h後精原榦細胞活性分彆下降18.8% (P<0.05)、30.0%(P<0.01)、38.6% (P<0.01)、41.0%(P<0.01),而正義A-myb ODNs組和空白對照組相比無明顯差異.結論 原癌基因A-myb可調節大鼠精原榦細胞的活性.
목적 연구원암기인A-myb재체외배양적9일령대서정원간세포활성중적작용.방법 용불련속밀도적Percoll액결합차속첩벽방법분리화순화정원간세포;용RT-PCR검측A-myb mRNA적표체;용Western blot검측A-myb표체산물A-myb적표체;용MTT비색법관찰반의A-myb탈양과핵감산(oligodeoxynucleotides,ODNs)대정원간세포작용적량효급시효관계.결과 분리제취적세포기본상위정원간세포.여공백대조조상비,10 μmol·L-1반의A-myb ODNs작용48 h후정원간세포내A-myb mRNA표체하강료47.8% (P<0.05),A-myb단백하강료51.7%(P<0.05).5、10、20μmol·L-1반의A-myb ODNs조여0μmol·L-1조재작용세포48 h후상비,정원간세포적활성분별하강11.8% (P<0.05)、50.1% (P<0.01)、53.8% (P<0.01).여공백대조조상비,10 μmol·L-1반의A-myb ODNs조작용12、24、48、72 h후정원간세포활성분별하강18.8% (P<0.05)、30.0%(P<0.01)、38.6% (P<0.01)、41.0%(P<0.01),이정의A-myb ODNs조화공백대조조상비무명현차이.결론 원암기인A-myb가조절대서정원간세포적활성.