西安交通大学学报（医学版）
西安交通大學學報（醫學版）
서안교통대학학보（의학판）
JOURNAL OF XI'AN JIAOTONG UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCES)
2012年
4期
416-420,455
,共6页
吕洋%王海萍%刘博%吴志刚%霍艳丽%高辰玮
呂洋%王海萍%劉博%吳誌剛%霍豔麗%高辰瑋
려양%왕해평%류박%오지강%곽염려%고신위
骨髓间充质干细胞%TGF-β%心肌细胞%细胞分化%细胞培养
骨髓間充質榦細胞%TGF-β%心肌細胞%細胞分化%細胞培養
골수간충질간세포%TGF-β%심기세포%세포분화%세포배양
目的 探讨转化生长因子β(TGF-β)对骨髓间充质干细胞(MSCs)定向分化为心肌样细胞的影响.方法 取SD大鼠四肢骨骨髓,分离培养MSCs,应用TGF-β1对第二代MSCs定向诱导,相差显微镜观察细胞形态学变化,应用免疫细胞化学技术检测诱导后4周MSCs结蛋白(desmin),α-横纹肌肌动蛋白(α-sarcomeric actin)、心肌肌钙蛋白T(CTnT)及p38MAPK的表达情况,并根据CTnT这一心肌源性特异性标记物的阳性率,分析心肌细胞的转化率；同时,以半定量RT-PCR方法在诱导后7、21、28d检测细胞心肌早期转录因子GATA-4和心肌特异性肌凝蛋白重链α-MHC的表达.结果 ①加入TGF-β1诱导后的MSCs,于7d时形态已转变成类长柱形,28 d时细胞体积则变小,呈条梭状排列,可观察到类肌管样结构.②TGF-β1诱导4周后的MSCs均可见desmin、α-sarcomeric actin及p38MAPK阳性细胞.诱导组的心肌样细胞转化率均显著高于对照组(P均＜0.01).③RT-PCR结果显示,诱导组细胞GATA-4于诱导后7d弱表达,21d表达增强,28 d表达减弱.α-MHC在诱导后7d不表达,21d弱表达,28 d表达明显.结论 骨髓间充质干细胞在TGF-β诱导下可定向分化为心肌样细胞.
目的 探討轉化生長因子β(TGF-β)對骨髓間充質榦細胞(MSCs)定嚮分化為心肌樣細胞的影響.方法 取SD大鼠四肢骨骨髓,分離培養MSCs,應用TGF-β1對第二代MSCs定嚮誘導,相差顯微鏡觀察細胞形態學變化,應用免疫細胞化學技術檢測誘導後4週MSCs結蛋白(desmin),α-橫紋肌肌動蛋白(α-sarcomeric actin)、心肌肌鈣蛋白T(CTnT)及p38MAPK的錶達情況,併根據CTnT這一心肌源性特異性標記物的暘性率,分析心肌細胞的轉化率；同時,以半定量RT-PCR方法在誘導後7、21、28d檢測細胞心肌早期轉錄因子GATA-4和心肌特異性肌凝蛋白重鏈α-MHC的錶達.結果 ①加入TGF-β1誘導後的MSCs,于7d時形態已轉變成類長柱形,28 d時細胞體積則變小,呈條梭狀排列,可觀察到類肌管樣結構.②TGF-β1誘導4週後的MSCs均可見desmin、α-sarcomeric actin及p38MAPK暘性細胞.誘導組的心肌樣細胞轉化率均顯著高于對照組(P均＜0.01).③RT-PCR結果顯示,誘導組細胞GATA-4于誘導後7d弱錶達,21d錶達增彊,28 d錶達減弱.α-MHC在誘導後7d不錶達,21d弱錶達,28 d錶達明顯.結論 骨髓間充質榦細胞在TGF-β誘導下可定嚮分化為心肌樣細胞.
목적 탐토전화생장인자β(TGF-β)대골수간충질간세포(MSCs)정향분화위심기양세포적영향.방법 취SD대서사지골골수,분리배양MSCs,응용TGF-β1대제이대MSCs정향유도,상차현미경관찰세포형태학변화,응용면역세포화학기술검측유도후4주MSCs결단백(desmin),α-횡문기기동단백(α-sarcomeric actin)、심기기개단백T(CTnT)급p38MAPK적표체정황,병근거CTnT저일심기원성특이성표기물적양성솔,분석심기세포적전화솔；동시,이반정량RT-PCR방법재유도후7、21、28d검측세포심기조기전록인자GATA-4화심기특이성기응단백중련α-MHC적표체.결과 ①가입TGF-β1유도후적MSCs,우7d시형태이전변성류장주형,28 d시세포체적칙변소,정조사상배렬,가관찰도류기관양결구.②TGF-β1유도4주후적MSCs균가견desmin、α-sarcomeric actin급p38MAPK양성세포.유도조적심기양세포전화솔균현저고우대조조(P균＜0.01).③RT-PCR결과현시,유도조세포GATA-4우유도후7d약표체,21d표체증강,28 d표체감약.α-MHC재유도후7d불표체,21d약표체,28 d표체명현.결론 골수간충질간세포재TGF-β유도하가정향분화위심기양세포.
