中国免疫学杂志
中國免疫學雜誌
중국면역학잡지
CHINESE JOURNAL OF IMMUNOLOGY
2003年
12期
841-844,849
,共5页
姚志娟%乌仁娜%毕东杰%楼晓%黄云中%冯凯%陈虎
姚誌娟%烏仁娜%畢東傑%樓曉%黃雲中%馮凱%陳虎
요지연%오인나%필동걸%루효%황운중%풍개%진호
CD34+细胞%胸腺基质细胞%诱导分化%T淋巴细胞
CD34+細胞%胸腺基質細胞%誘導分化%T淋巴細胞
CD34+세포%흉선기질세포%유도분화%T림파세포
目的:建立利用人造血干/祖细胞体外定向诱导分化为T淋巴细胞的方法,为研究T细胞生物学特性及细胞免疫提供技术平台.方法:MACS方法分离人脐带CD34+细胞接种到人胎儿胸腺基质单层细胞上,IMDM液体培养基含20%人AB血清并加入FL、IL-12、IL-7和IL-2细胞因子组合,于培养7、14、21、28、35、42天取非贴壁细胞利用流式细胞仪对细胞表型进行检测,并进行细胞形态学分析.结果:2周后,CD4+CD8+非成熟T淋巴细胞占细胞总数的0.3%~13.3%,4~5周CD4+CD8+T淋巴细胞达到高峰占16.6%~26.5%,且CD3+CD4+CD8+和CD3+CD4-CD8+T淋巴细胞逐渐增多,6周后达26.5%~64.9%和11.6%~38.9%.培养成熟的T淋巴细胞经PHA+IL-2刺激后瑞氏染色鉴定可见大原始淋巴细胞存在.结论:利用人脐血CD34+在体外人胎儿胸腺基质单层细胞上加FL、IL-12、IL-7和IL-2细胞因子组合条件下,可诱导分化出T淋巴细胞,并且培养的T细胞对有丝分裂素刺激有增殖反应.
目的:建立利用人造血榦/祖細胞體外定嚮誘導分化為T淋巴細胞的方法,為研究T細胞生物學特性及細胞免疫提供技術平檯.方法:MACS方法分離人臍帶CD34+細胞接種到人胎兒胸腺基質單層細胞上,IMDM液體培養基含20%人AB血清併加入FL、IL-12、IL-7和IL-2細胞因子組閤,于培養7、14、21、28、35、42天取非貼壁細胞利用流式細胞儀對細胞錶型進行檢測,併進行細胞形態學分析.結果:2週後,CD4+CD8+非成熟T淋巴細胞佔細胞總數的0.3%~13.3%,4~5週CD4+CD8+T淋巴細胞達到高峰佔16.6%~26.5%,且CD3+CD4+CD8+和CD3+CD4-CD8+T淋巴細胞逐漸增多,6週後達26.5%~64.9%和11.6%~38.9%.培養成熟的T淋巴細胞經PHA+IL-2刺激後瑞氏染色鑒定可見大原始淋巴細胞存在.結論:利用人臍血CD34+在體外人胎兒胸腺基質單層細胞上加FL、IL-12、IL-7和IL-2細胞因子組閤條件下,可誘導分化齣T淋巴細胞,併且培養的T細胞對有絲分裂素刺激有增殖反應.
목적:건립이용인조혈간/조세포체외정향유도분화위T림파세포적방법,위연구T세포생물학특성급세포면역제공기술평태.방법:MACS방법분리인제대CD34+세포접충도인태인흉선기질단층세포상,IMDM액체배양기함20%인AB혈청병가입FL、IL-12、IL-7화IL-2세포인자조합,우배양7、14、21、28、35、42천취비첩벽세포이용류식세포의대세포표형진행검측,병진행세포형태학분석.결과:2주후,CD4+CD8+비성숙T림파세포점세포총수적0.3%~13.3%,4~5주CD4+CD8+T림파세포체도고봉점16.6%~26.5%,차CD3+CD4+CD8+화CD3+CD4-CD8+T림파세포축점증다,6주후체26.5%~64.9%화11.6%~38.9%.배양성숙적T림파세포경PHA+IL-2자격후서씨염색감정가견대원시림파세포존재.결론:이용인제혈CD34+재체외인태인흉선기질단층세포상가FL、IL-12、IL-7화IL-2세포인자조합조건하,가유도분화출T림파세포,병차배양적T세포대유사분렬소자격유증식반응.