吉林大学学报(理学版)
吉林大學學報(理學版)
길림대학학보(이학판)
JOURNAL OF JILIN UNIVERSITY(SCIENCE EDITION)
2004年
3期
458-462
,共5页
李维佳%魏景艳%孙晔%牟颖%吕绍武%闫岗林%罗贵民
李維佳%魏景豔%孫曄%牟穎%呂紹武%閆崗林%囉貴民
리유가%위경염%손엽%모영%려소무%염강림%라귀민
谷胱甘肽过氧化物酶%单链抗体%可溶性表达%抗氧化
穀胱甘肽過氧化物酶%單鏈抗體%可溶性錶達%抗氧化
곡광감태과양화물매%단련항체%가용성표체%항양화
为实现单链抗体的可溶性表达, 制备具有谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)活力的单链抗体, 在单链抗体表达载体pTMF-2F3上去除原2F3基因N端非必需的18个氨基酸, 采用新的表达载体pRose质粒, 在2F3的N端引入13个氨基酸的前导肽, 转入BL21(lys S)中, 使其分泌到大肠杆菌的周质腔中得以表达, 获得可溶性表达产物.产物经过分离纯化、 Western Blot印迹和硒化测活确定具有GPX活性的鼠单链抗体, 其GPX活力为2 530 U/μmol.以脂质过氧化、细胞存活率和细胞膜完整性为指标的抗氧化实验研究表明, 具有GPX活性的单链抗体对大鼠乳鼠表皮细胞有抗紫外线损伤的作用, 是膜脂质过氧化的有效抑制剂.
為實現單鏈抗體的可溶性錶達, 製備具有穀胱甘肽過氧化物酶(GPX)活力的單鏈抗體, 在單鏈抗體錶達載體pTMF-2F3上去除原2F3基因N耑非必需的18箇氨基痠, 採用新的錶達載體pRose質粒, 在2F3的N耑引入13箇氨基痠的前導肽, 轉入BL21(lys S)中, 使其分泌到大腸桿菌的週質腔中得以錶達, 穫得可溶性錶達產物.產物經過分離純化、 Western Blot印跡和硒化測活確定具有GPX活性的鼠單鏈抗體, 其GPX活力為2 530 U/μmol.以脂質過氧化、細胞存活率和細胞膜完整性為指標的抗氧化實驗研究錶明, 具有GPX活性的單鏈抗體對大鼠乳鼠錶皮細胞有抗紫外線損傷的作用, 是膜脂質過氧化的有效抑製劑.
위실현단련항체적가용성표체, 제비구유곡광감태과양화물매(GPX)활력적단련항체, 재단련항체표체재체pTMF-2F3상거제원2F3기인N단비필수적18개안기산, 채용신적표체재체pRose질립, 재2F3적N단인입13개안기산적전도태, 전입BL21(lys S)중, 사기분비도대장간균적주질강중득이표체, 획득가용성표체산물.산물경과분리순화、 Western Blot인적화서화측활학정구유GPX활성적서단련항체, 기GPX활력위2 530 U/μmol.이지질과양화、세포존활솔화세포막완정성위지표적항양화실험연구표명, 구유GPX활성적단련항체대대서유서표피세포유항자외선손상적작용, 시막지질과양화적유효억제제.
