汉坦病毒H8205株G1P基因片段重组杆状病毒表达载体的构建及表达
한탄병독H8205주G1P기인편단중조간상병독표체재체적구건급표체
The Construction of Recombination Baculovirus Expression Vector of Hantavirus H8205's G1P Gene Fragment and Its Expression
  • 万方数据
    中国生物化学与分子生物学报 중국생물화학여분자생물학보
    CHINESE JOURNAL OF BIOCHEMISTRY AND MOLECULAR BIOLOGY
    2005年 6期 786-790 ,共5页

    谭刚%常国辉%刘伯华%刘洪%韩伟国%吕富双%康晓萍%张雨%杨保安%秦鄂德%祝庆余

    담강%상국휘%류백화%류홍%한위국%려부쌍%강효평%장우%양보안%진악덕%축경여

    汉坦病毒H8205株%Sf9昆虫细胞%杆状病毒表达系统 漢坦病毒H8205株%Sf9昆蟲細胞%桿狀病毒錶達繫統
    한탄병독H8205주%Sf9곤충세포%간상병독표체계통
    将汉坦病毒H8205株G1P基因的保守序列(约1 000 bp)作为目的基因插入到Bac-to-Bac杆状病毒表达系统的pFastBac HTb供体质粒中,利用Tn7转座子同Bacmid DNA同源重组,获得了含目的基因片段的重组杆状病毒DNA,并利用其转染Sf9昆虫细胞,72 h后收集细胞悬液,再用该悬液侵染Sf9昆虫细胞,48 h后收获病毒.采用IFA分析收获的产物,观察到了特异性的荧光,并且采用SDS-PAGE和Western印迹也获得了与预期一致的结果.证明感染后的Sf9昆虫细胞所表达的蛋白中含有能与抗汉坦病毒H8205株多克隆抗体特异性结合目的蛋白.研究表明,采用杆状病毒表达系统可以成功表达出汉坦病毒H8205株包膜糖蛋白G1基因片段,为开发适合的以G1P为抗原的汉坦病毒诊断试剂进行了前期的探索.
    장한탄병독H8205주G1P기인적보수서렬(약1 000 bp)작위목적기인삽입도Bac-to-Bac간상병독표체계통적pFastBac HTb공체질립중,이용Tn7전좌자동Bacmid DNA동원중조,획득료함목적기인편단적중조간상병독DNA,병이용기전염Sf9곤충세포,72 h후수집세포현액,재용해현액침염Sf9곤충세포,48 h후수획병독.채용IFA분석수획적산물,관찰도료특이성적형광,병차채용SDS-PAGE화Western인적야획득료여예기일치적결과.증명감염후적Sf9곤충세포소표체적단백중함유능여항한탄병독H8205주다극륭항체특이성결합목적단백.연구표명,채용간상병독표체계통가이성공표체출한탄병독H8205주포막당단백G1기인편단,위개발괄합적이G1P위항원적한탄병독진단시제진행료전기적탐색.
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