武汉大学学报（理学版）
武漢大學學報（理學版）
무한대학학보（이학판）
JOURNAL OF WUHAN UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE EDITION)
2006年
6期
733-738
,共6页
罗君毅%盖伟伟%雷磊%涂浩波%鄢慧民
囉君毅%蓋偉偉%雷磊%塗浩波%鄢慧民
라군의%개위위%뢰뢰%도호파%언혜민
SARS-CoV%S蛋白%粘膜免疫效应%滴鼻免疫
SARS-CoV%S蛋白%粘膜免疫效應%滴鼻免疫
SARS-CoV%S단백%점막면역효응%적비면역
SARS 冠状病毒(SARS-CoV)的S(Spike)蛋白是病毒表面最主要的膜蛋白,在病毒的感染过程中起重要作用,是冠状病毒的主要抗原.以SARS 冠状病毒的cDNA 为模板,通过PCR 得到SΔ1(151～1 200 bp)、SΔ2(1 201～2 250 bp)和SΔ3(2 251～3 150 bp)3段基因序列,克隆到表达载体pET-32a,在大肠杆菌BL21 中诱导表达得到包涵体蛋白,经Western blot 检测正确后,将此作为抗原以滴鼻和腹腔注射两种不同的途径免疫BALB/c 雌性小鼠,3次免疫之后采集小鼠的血清和肺洗液,经酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测其中的抗体IgG 和IgA.结果表明S蛋白通过滴鼻途径既能刺激产生一定的血清IgG,更能诱导肺粘膜产生特异IgA 抗体.进一步比较分析发现,诱导粘膜免疫的效应区域主要位于SΔ2(401～750 aa)蛋白区段.
SARS 冠狀病毒(SARS-CoV)的S(Spike)蛋白是病毒錶麵最主要的膜蛋白,在病毒的感染過程中起重要作用,是冠狀病毒的主要抗原.以SARS 冠狀病毒的cDNA 為模闆,通過PCR 得到SΔ1(151～1 200 bp)、SΔ2(1 201～2 250 bp)和SΔ3(2 251～3 150 bp)3段基因序列,剋隆到錶達載體pET-32a,在大腸桿菌BL21 中誘導錶達得到包涵體蛋白,經Western blot 檢測正確後,將此作為抗原以滴鼻和腹腔註射兩種不同的途徑免疫BALB/c 雌性小鼠,3次免疫之後採集小鼠的血清和肺洗液,經酶聯免疫吸附實驗(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)檢測其中的抗體IgG 和IgA.結果錶明S蛋白通過滴鼻途徑既能刺激產生一定的血清IgG,更能誘導肺粘膜產生特異IgA 抗體.進一步比較分析髮現,誘導粘膜免疫的效應區域主要位于SΔ2(401～750 aa)蛋白區段.
SARS 관상병독(SARS-CoV)적S(Spike)단백시병독표면최주요적막단백,재병독적감염과정중기중요작용,시관상병독적주요항원.이SARS 관상병독적cDNA 위모판,통과PCR 득도SΔ1(151～1 200 bp)、SΔ2(1 201～2 250 bp)화SΔ3(2 251～3 150 bp)3단기인서렬,극륭도표체재체pET-32a,재대장간균BL21 중유도표체득도포함체단백,경Western blot 검측정학후,장차작위항원이적비화복강주사량충불동적도경면역BALB/c 자성소서,3차면역지후채집소서적혈청화폐세액,경매련면역흡부실험(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)검측기중적항체IgG 화IgA.결과표명S단백통과적비도경기능자격산생일정적혈청IgG,경능유도폐점막산생특이IgA 항체.진일보비교분석발현,유도점막면역적효응구역주요위우SΔ2(401～750 aa)단백구단.
