中国生物工程杂志
中國生物工程雜誌
중국생물공정잡지
JOURNAL OF CHINESE BIOTECHNOLOGY
2007年
3期
12-18
,共7页
黄勇%张晓楠%王涛%王丽%关路媛%陈南春%陈苏民%CHEN Su-min
黃勇%張曉楠%王濤%王麗%關路媛%陳南春%陳囌民%CHEN Su-min
황용%장효남%왕도%왕려%관로원%진남춘%진소민%CHEN Su-min
双启动子表达载体%YggG蛋白%Era蛋白%功能研究
雙啟動子錶達載體%YggG蛋白%Era蛋白%功能研究
쌍계동자표체재체%YggG단백%Era단백%공능연구
yggG是从大肠杆菌全基因组文库中钓取并克隆的Era结合蛋白基因,研究表明该基因可能表达产物YggG294蛋白对宿主菌的生长具有强烈的抑制作用.为了阐明YggG294所引起的细菌生长抑制是否与Era相关,构建可同时可控性表达Era和YggG294蛋白的双启动子表达载体.利用所构建的双启动子表达载体在同一细胞中同时可控性地表达YggG294与Era蛋白.结果显示,在不表达和少量表达YggG294的细菌细胞内,Era的表达量与总蛋白量的比值随着诱导时间增加而增高,而YggG294大量表达的细菌内Era的表达量未明显改变,并且Era的表达量与总蛋白量的比值基本保持不变,但是在全细胞裂解液中并未检测到Era蛋白的降解产物;Era蛋白的预表达对YggG294表达所引起的细菌生长率下降无影响.上述结果说明,YggG294对Era蛋白无水解作用,YggG与Era蛋白间的相互作用与YggG294对细菌生长抑制作用无直接的联系.由此可以推论,Era与YggG294引起的细菌生长抑制无关,YggG294是通过其它途径引起宿主菌生长抑制.
yggG是從大腸桿菌全基因組文庫中釣取併剋隆的Era結閤蛋白基因,研究錶明該基因可能錶達產物YggG294蛋白對宿主菌的生長具有彊烈的抑製作用.為瞭闡明YggG294所引起的細菌生長抑製是否與Era相關,構建可同時可控性錶達Era和YggG294蛋白的雙啟動子錶達載體.利用所構建的雙啟動子錶達載體在同一細胞中同時可控性地錶達YggG294與Era蛋白.結果顯示,在不錶達和少量錶達YggG294的細菌細胞內,Era的錶達量與總蛋白量的比值隨著誘導時間增加而增高,而YggG294大量錶達的細菌內Era的錶達量未明顯改變,併且Era的錶達量與總蛋白量的比值基本保持不變,但是在全細胞裂解液中併未檢測到Era蛋白的降解產物;Era蛋白的預錶達對YggG294錶達所引起的細菌生長率下降無影響.上述結果說明,YggG294對Era蛋白無水解作用,YggG與Era蛋白間的相互作用與YggG294對細菌生長抑製作用無直接的聯繫.由此可以推論,Era與YggG294引起的細菌生長抑製無關,YggG294是通過其它途徑引起宿主菌生長抑製.
yggG시종대장간균전기인조문고중조취병극륭적Era결합단백기인,연구표명해기인가능표체산물YggG294단백대숙주균적생장구유강렬적억제작용.위료천명YggG294소인기적세균생장억제시부여Era상관,구건가동시가공성표체Era화YggG294단백적쌍계동자표체재체.이용소구건적쌍계동자표체재체재동일세포중동시가공성지표체YggG294여Era단백.결과현시,재불표체화소량표체YggG294적세균세포내,Era적표체량여총단백량적비치수착유도시간증가이증고,이YggG294대량표체적세균내Era적표체량미명현개변,병차Era적표체량여총단백량적비치기본보지불변,단시재전세포렬해액중병미검측도Era단백적강해산물;Era단백적예표체대YggG294표체소인기적세균생장솔하강무영향.상술결과설명,YggG294대Era단백무수해작용,YggG여Era단백간적상호작용여YggG294대세균생장억제작용무직접적련계.유차가이추론,Era여YggG294인기적세균생장억제무관,YggG294시통과기타도경인기숙주균생장억제.
