分析测试学报
分析測試學報
분석측시학보
JOURNAL OF INSTRUMENTAL ANALYSIS
2009年
8期
985-988
,共4页
黄赛花%苏流坤%张浩原%刘申%孙翠香%梁玉清
黃賽花%囌流坤%張浩原%劉申%孫翠香%樑玉清
황새화%소류곤%장호원%류신%손취향%량옥청
甲醛脱氢酶%分光光度法%霉菌%酶活性
甲醛脫氫酶%分光光度法%黴菌%酶活性
갑철탈경매%분광광도법%매균%매활성
甲醛在甲醛脱氢酶的作用下与辅酶Ⅰ(NAD)形成甲酸或甲酸盐,根据其生成的还原型辅酶Ⅰ二钠盐(β-NADH)的量与吸光度成正比,建立了测定3株霉菌在3个处理方法中的甲醛脱氢酶活性的分光光度法.以绿色木霉(Trichoderma viride)、爪哇青霉(Penicillium javanicum)、黄曲霉(Aspergillus flavus) 3株甲醛降解霉菌为材料,通过全温振荡培养,pH 7.5的0.05 mol/L 的磷酸钾缓冲溶液洗涤、离心、提取,并在37 ℃、pH 7.5、340 nm处测定甲醛脱氢酶活性.结果表明:细胞破碎处理1(600 W,工作5 s、间歇7 s,60次)破碎细胞不完全,只能测得部分酶活性;细胞破碎处理3(800 W,工作5 s、间歇7 s,60次)破碎细胞完全,但破坏了部分酶活性;细胞破碎处理2(700 W,工作5 s、间歇7 s,60次)能很好地破碎细胞且对酶活性的破坏最少,测得最高酶活性.
甲醛在甲醛脫氫酶的作用下與輔酶Ⅰ(NAD)形成甲痠或甲痠鹽,根據其生成的還原型輔酶Ⅰ二鈉鹽(β-NADH)的量與吸光度成正比,建立瞭測定3株黴菌在3箇處理方法中的甲醛脫氫酶活性的分光光度法.以綠色木黴(Trichoderma viride)、爪哇青黴(Penicillium javanicum)、黃麯黴(Aspergillus flavus) 3株甲醛降解黴菌為材料,通過全溫振盪培養,pH 7.5的0.05 mol/L 的燐痠鉀緩遲溶液洗滌、離心、提取,併在37 ℃、pH 7.5、340 nm處測定甲醛脫氫酶活性.結果錶明:細胞破碎處理1(600 W,工作5 s、間歇7 s,60次)破碎細胞不完全,隻能測得部分酶活性;細胞破碎處理3(800 W,工作5 s、間歇7 s,60次)破碎細胞完全,但破壞瞭部分酶活性;細胞破碎處理2(700 W,工作5 s、間歇7 s,60次)能很好地破碎細胞且對酶活性的破壞最少,測得最高酶活性.
갑철재갑철탈경매적작용하여보매Ⅰ(NAD)형성갑산혹갑산염,근거기생성적환원형보매Ⅰ이납염(β-NADH)적량여흡광도성정비,건립료측정3주매균재3개처리방법중적갑철탈경매활성적분광광도법.이록색목매(Trichoderma viride)、조왜청매(Penicillium javanicum)、황곡매(Aspergillus flavus) 3주갑철강해매균위재료,통과전온진탕배양,pH 7.5적0.05 mol/L 적린산갑완충용액세조、리심、제취,병재37 ℃、pH 7.5、340 nm처측정갑철탈경매활성.결과표명:세포파쇄처리1(600 W,공작5 s、간헐7 s,60차)파쇄세포불완전,지능측득부분매활성;세포파쇄처리3(800 W,공작5 s、간헐7 s,60차)파쇄세포완전,단파배료부분매활성;세포파쇄처리2(700 W,공작5 s、간헐7 s,60차)능흔호지파쇄세포차대매활성적파배최소,측득최고매활성.
