hBcl-2和hVEGF165双基因重组腺病毒载体转染大鼠骨髓间充质干细胞的实验研究
hBcl-2화hVEGF165쌍기인중조선병독재체전염대서골수간충질간세포적실험연구
Transfection of rat bone marrow mesenchymal stem cells with adenovirus vector carrying hBcl-2 and hVEGF165 genes
  • 万方数据
    广东医学 엄동의학
    GUNAGDONG MEDICAL JOURNAL
    2011年 5期 548-551 ,共4页

    林育辉%何晓青%倪晓彬%侯宁%董颀%罗承锋%刘世明%赵路宁%陈敏生

    림육휘%하효청%예효빈%후저%동기%라승봉%류세명%조로저%진민생

    hBcl-2基因%hVEGF165基因%骨髓间充质干细胞%腺病毒载体 hBcl-2基因%hVEGF165基因%骨髓間充質榦細胞%腺病毒載體
    hBcl-2기인%hVEGF165기인%골수간충질간세포%선병독재체
    目的 将hBcl-2和hVEGF165双基因共表达重组腺病毒载体转染大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs),检测目的 基因的表达及表达产物的生物学效应.方法 贴壁培养法分离纯化大鼠骨髓间充质干细胞;重组腺病毒转染BMSCs,用PCR法验证目的 基因mRNA在间充质干细胞中的表达;用ELISA及Western Blot检测双基因在转染后细胞的蛋白表达量;用MTT法及Annexin V-PE/7-AAD法分别观察对转染后BMSCs增殖及凋亡的影响.结果 大鼠BMSCs分离纯化成功.在mRNA水平,转染后的BMSCs可表达这两个外源基因;转染后细胞培养上清液hVEGF165峰浓度达到(924.3±56.5) pg/mL,多个时间点与对照组相比,浓度差异有统计学意义(P＜0.05);Western Blot也检测到转染后细胞Bcl-2蛋白表达量明显比对照组增加(P＜0.05).MTT比色法观察到,转染细胞分泌的hVEGF165上清液可促进BMSCs的增殖(P＜0.05);用Annexin V-PE/7-AAD检测转染后间充质干细胞的凋亡率下降,与对照组相比差异有统计学意义(P＜0.05).结论 转染重组腺病毒载体的BMSCs能够表达hBcl-2及hVEGF165,并且表达产物具有生物学效应.
    목적 장hBcl-2화hVEGF165쌍기인공표체중조선병독재체전염대서골수간충질간세포(BMSCs),검측목적 기인적표체급표체산물적생물학효응.방법 첩벽배양법분리순화대서골수간충질간세포;중조선병독전염BMSCs,용PCR법험증목적 기인mRNA재간충질간세포중적표체;용ELISA급Western Blot검측쌍기인재전염후세포적단백표체량;용MTT법급Annexin V-PE/7-AAD법분별관찰대전염후BMSCs증식급조망적영향.결과 대서BMSCs분리순화성공.재mRNA수평,전염후적BMSCs가표체저량개외원기인;전염후세포배양상청액hVEGF165봉농도체도(924.3±56.5) pg/mL,다개시간점여대조조상비,농도차이유통계학의의(P＜0.05);Western Blot야검측도전염후세포Bcl-2단백표체량명현비대조조증가(P＜0.05).MTT비색법관찰도,전염세포분비적hVEGF165상청액가촉진BMSCs적증식(P＜0.05);용Annexin V-PE/7-AAD검측전염후간충질간세포적조망솔하강,여대조조상비차이유통계학의의(P＜0.05).결론 전염중조선병독재체적BMSCs능구표체hBcl-2급hVEGF165,병차표체산물구유생물학효응.
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