华中农业大学学报
華中農業大學學報
화중농업대학학보
JOURNAL OF HUAZHONG AGRICULTURAL UNIVERSITY
2011年
6期
759-763
,共5页
潘晓艺%沈锦玉%郝贵杰%姚嘉贇%徐洋%尹文林%孙逢明%吴颖蕾
潘曉藝%瀋錦玉%郝貴傑%姚嘉贇%徐洋%尹文林%孫逢明%吳穎蕾
반효예%침금옥%학귀걸%요가빈%서양%윤문림%손봉명%오영뢰
气单胞菌%嗜水气单胞菌%16S rRNA%GCAT基因%双重PCR
氣單胞菌%嗜水氣單胞菌%16S rRNA%GCAT基因%雙重PCR
기단포균%기수기단포균%16S rRNA%GCAT기인%쌍중PCR
针对GenBank中登录的气单胞菌属(Aeromonas)的毒力基因甘油磷脂胆固醇酰基转移酶基因(GCA T)和嗜水气单胞菌(Aeromonash ydrophila)的16S rRNA基因的保守区设计2对特异性引物.通过进行双重PCR反应体系优化,PCR产物的测序鉴定和特异性试验,建立了一种能同时检测气单胞菌(Aeromonas spp.)和嗜水气单胞菌的双重PCR检测方法.用此方法对5株嗜水气单胞菌、7株其他不同种的气单胞菌和5株非气单胞菌属菌株进行双重PCR检测.结果显示,气单胞菌和嗜水气单胞菌在GCAT基因的扩增区都能得到有效扩增,其中嗜水气单胞菌能同时在16S rRNA基因扩增区得到有效扩增,而非气单胞菌属的菌株,在此两扩增区都为阴性,表明此检测方法可靠且可行.
針對GenBank中登錄的氣單胞菌屬(Aeromonas)的毒力基因甘油燐脂膽固醇酰基轉移酶基因(GCA T)和嗜水氣單胞菌(Aeromonash ydrophila)的16S rRNA基因的保守區設計2對特異性引物.通過進行雙重PCR反應體繫優化,PCR產物的測序鑒定和特異性試驗,建立瞭一種能同時檢測氣單胞菌(Aeromonas spp.)和嗜水氣單胞菌的雙重PCR檢測方法.用此方法對5株嗜水氣單胞菌、7株其他不同種的氣單胞菌和5株非氣單胞菌屬菌株進行雙重PCR檢測.結果顯示,氣單胞菌和嗜水氣單胞菌在GCAT基因的擴增區都能得到有效擴增,其中嗜水氣單胞菌能同時在16S rRNA基因擴增區得到有效擴增,而非氣單胞菌屬的菌株,在此兩擴增區都為陰性,錶明此檢測方法可靠且可行.
침대GenBank중등록적기단포균속(Aeromonas)적독력기인감유린지담고순선기전이매기인(GCA T)화기수기단포균(Aeromonash ydrophila)적16S rRNA기인적보수구설계2대특이성인물.통과진행쌍중PCR반응체계우화,PCR산물적측서감정화특이성시험,건립료일충능동시검측기단포균(Aeromonas spp.)화기수기단포균적쌍중PCR검측방법.용차방법대5주기수기단포균、7주기타불동충적기단포균화5주비기단포균속균주진행쌍중PCR검측.결과현시,기단포균화기수기단포균재GCAT기인적확증구도능득도유효확증,기중기수기단포균능동시재16S rRNA기인확증구득도유효확증,이비기단포균속적균주,재차량확증구도위음성,표명차검측방법가고차가행.
