草业学报
草業學報
초업학보
PRATACULTURAL SCIENCE
2012年
2期
133-140
,共8页
何庆元%王吴斌%杨红燕%向仕华%周丽英%王松华
何慶元%王吳斌%楊紅燕%嚮仕華%週麗英%王鬆華
하경원%왕오빈%양홍연%향사화%주려영%왕송화
苜蓿%SCoT%条件优化%秋眠型%遗传多样性
苜蓿%SCoT%條件優化%鞦眠型%遺傳多樣性
목숙%SCoT%조건우화%추면형%유전다양성
用L16 (45)正交实验设计研究模板DNA、dNTPs、Mg2+、Taq酶和引物5个因素的浓度对SCoT扩增迁移率重现率的影响.结果表明,在20 μL反应体系中,2.5 ng/μL DNA、1.00 mmol/L Mg2+、1.20 UTaq酶、0.40mmol/L dNTPs和0.30 μmol/L浓度的引物最为稳定,重现率达到100％.利用最优反应体系从50条引物中筛选出13条扩增效果好的引物,将它们分别扩增34个苜蓿品种,共检测到103个SCoT标记,其中92个位点具有多态性.聚类分析表明,从安徽和江苏两地收集的野生南苜蓿和栽培苜蓿的遗传距离最远,单独聚为一类；其余32个品种苜蓿在相似系数0.757附近分为3个亚群,秋眠型苜蓿品种主要分布在第Ⅱ亚群中,半秋眠型在3个亚群中都有分布,而非秋眠型苜蓿分布在第一和第二亚群中,表明SCoT标记的聚类结果在一定程度上能够反映苜蓿的秋眠型,但并不完全一致.
用L16 (45)正交實驗設計研究模闆DNA、dNTPs、Mg2+、Taq酶和引物5箇因素的濃度對SCoT擴增遷移率重現率的影響.結果錶明,在20 μL反應體繫中,2.5 ng/μL DNA、1.00 mmol/L Mg2+、1.20 UTaq酶、0.40mmol/L dNTPs和0.30 μmol/L濃度的引物最為穩定,重現率達到100％.利用最優反應體繫從50條引物中篩選齣13條擴增效果好的引物,將它們分彆擴增34箇苜蓿品種,共檢測到103箇SCoT標記,其中92箇位點具有多態性.聚類分析錶明,從安徽和江囌兩地收集的野生南苜蓿和栽培苜蓿的遺傳距離最遠,單獨聚為一類；其餘32箇品種苜蓿在相似繫數0.757附近分為3箇亞群,鞦眠型苜蓿品種主要分佈在第Ⅱ亞群中,半鞦眠型在3箇亞群中都有分佈,而非鞦眠型苜蓿分佈在第一和第二亞群中,錶明SCoT標記的聚類結果在一定程度上能夠反映苜蓿的鞦眠型,但併不完全一緻.
용L16 (45)정교실험설계연구모판DNA、dNTPs、Mg2+、Taq매화인물5개인소적농도대SCoT확증천이솔중현솔적영향.결과표명,재20 μL반응체계중,2.5 ng/μL DNA、1.00 mmol/L Mg2+、1.20 UTaq매、0.40mmol/L dNTPs화0.30 μmol/L농도적인물최위은정,중현솔체도100％.이용최우반응체계종50조인물중사선출13조확증효과호적인물,장타문분별확증34개목숙품충,공검측도103개SCoT표기,기중92개위점구유다태성.취류분석표명,종안휘화강소량지수집적야생남목숙화재배목숙적유전거리최원,단독취위일류；기여32개품충목숙재상사계수0.757부근분위3개아군,추면형목숙품충주요분포재제Ⅱ아군중,반추면형재3개아군중도유분포,이비추면형목숙분포재제일화제이아군중,표명SCoT표기적취류결과재일정정도상능구반영목숙적추면형,단병불완전일치.
