中国兽医科学
中國獸醫科學
중국수의과학
VETERINARY SCIENCE IN CHINA
2007年
2期
108-112
,共5页
朱绍辉%吴延功%单虎%王志亮%姜同泉%孙承英%赵永刚
硃紹輝%吳延功%單虎%王誌亮%薑同泉%孫承英%趙永剛
주소휘%오연공%단호%왕지량%강동천%손승영%조영강
猪附红细胞体%实时荧光定量PCR%荧光染料
豬附紅細胞體%實時熒光定量PCR%熒光染料
저부홍세포체%실시형광정량PCR%형광염료
参照猪附红细胞体16 S rRNA基因序列设计了1对引物,分别以标准株和分离株的基因组DNA为模板,采用SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR方法检测猪附红细胞体,确定特异性产物的Tm值,同时做普通PCR.试验结果表明,特异性产物的Tm值为88.5℃,最低能检测到含0.036 fg/μL阳性质粒的标准品.以阳性质粒标准品10倍倍比稀释的模板进行实时荧光定量PCR,通过对反应体系和反应条件进行筛选和优化,建立了检测猪附红细胞体的标准曲线.建立的SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法显示了较好的特异性、敏感性和广谱性,为猪附红细胞体病的临床检测和流行情况调查提供了新的技术手段.
參照豬附紅細胞體16 S rRNA基因序列設計瞭1對引物,分彆以標準株和分離株的基因組DNA為模闆,採用SYBR Green Ⅰ實時熒光定量PCR方法檢測豬附紅細胞體,確定特異性產物的Tm值,同時做普通PCR.試驗結果錶明,特異性產物的Tm值為88.5℃,最低能檢測到含0.036 fg/μL暘性質粒的標準品.以暘性質粒標準品10倍倍比稀釋的模闆進行實時熒光定量PCR,通過對反應體繫和反應條件進行篩選和優化,建立瞭檢測豬附紅細胞體的標準麯線.建立的SYBR Green Ⅰ實時熒光定量PCR檢測方法顯示瞭較好的特異性、敏感性和廣譜性,為豬附紅細胞體病的臨床檢測和流行情況調查提供瞭新的技術手段.
삼조저부홍세포체16 S rRNA기인서렬설계료1대인물,분별이표준주화분리주적기인조DNA위모판,채용SYBR Green Ⅰ실시형광정량PCR방법검측저부홍세포체,학정특이성산물적Tm치,동시주보통PCR.시험결과표명,특이성산물적Tm치위88.5℃,최저능검측도함0.036 fg/μL양성질립적표준품.이양성질립표준품10배배비희석적모판진행실시형광정량PCR,통과대반응체계화반응조건진행사선화우화,건립료검측저부홍세포체적표준곡선.건립적SYBR Green Ⅰ실시형광정량PCR검측방법현시료교호적특이성、민감성화엄보성,위저부홍세포체병적림상검측화류행정황조사제공료신적기술수단.
