解放军预防医学杂志
解放軍預防醫學雜誌
해방군예방의학잡지
JOURNAL OF PREVENTIVE MEDICINE OF CHINESE PEOPLE'S LIBERATION ARMY
2008年
2期
112-113
,共2页
李殉%李素芝%李淑梅%薛采芳%刘忠湘%谢刚%王洪斌
李殉%李素芝%李淑梅%薛採芳%劉忠湘%謝剛%王洪斌
리순%리소지%리숙매%설채방%류충상%사강%왕홍빈
红细胞增多症%转基因%促红细胞生成素
紅細胞增多癥%轉基因%促紅細胞生成素
홍세포증다증%전기인%촉홍세포생성소
目的 尝试采用活体转基因:肌注导入外源促红细胞生成素(EPO)基因,促使小鼠红细胞过度生成,为验证有关干预药物的体内效应和探索疾病发病机制提供动物实验对象.方法 取急进高原大鼠肾脏组织用RNeasy Mini Kit提取总RNA,通过RT-PCR克隆大鼠EPO编码基因,构建真核转染质粒,经肌肉途径注射小鼠,对小鼠血液有关指标的变化进行检测.结果 DNA测序结果 证实,采用RT-RCR方法 成功地克隆了Wistar大鼠EPO编码基因,其编码序列与GenBank发布的序列gi:8393315完全一致,并构建真核转染载体pcDNA3/EPO,经肌内注射后显著促进小鼠的红细胞生成,与对照组相比,各实验组小鼠全血红细胞压积(Hct),外周血网织红细胞比例以及血浆红细胞生成素(EPO)水平增加均有显著性(P＜0.05,P＜0.01),各项指标值随质粒用量的增加而上升.结论 通过肌注导入外源EPO基因是促进小鼠红细胞过度生成的有效方法 ,本实验方法 简单易行,无需特殊设备条件,为在高原实地开展相关研究提供了良好的基础.
目的 嘗試採用活體轉基因:肌註導入外源促紅細胞生成素(EPO)基因,促使小鼠紅細胞過度生成,為驗證有關榦預藥物的體內效應和探索疾病髮病機製提供動物實驗對象.方法 取急進高原大鼠腎髒組織用RNeasy Mini Kit提取總RNA,通過RT-PCR剋隆大鼠EPO編碼基因,構建真覈轉染質粒,經肌肉途徑註射小鼠,對小鼠血液有關指標的變化進行檢測.結果 DNA測序結果 證實,採用RT-RCR方法 成功地剋隆瞭Wistar大鼠EPO編碼基因,其編碼序列與GenBank髮佈的序列gi:8393315完全一緻,併構建真覈轉染載體pcDNA3/EPO,經肌內註射後顯著促進小鼠的紅細胞生成,與對照組相比,各實驗組小鼠全血紅細胞壓積(Hct),外週血網織紅細胞比例以及血漿紅細胞生成素(EPO)水平增加均有顯著性(P＜0.05,P＜0.01),各項指標值隨質粒用量的增加而上升.結論 通過肌註導入外源EPO基因是促進小鼠紅細胞過度生成的有效方法 ,本實驗方法 簡單易行,無需特殊設備條件,為在高原實地開展相關研究提供瞭良好的基礎.
목적 상시채용활체전기인:기주도입외원촉홍세포생성소(EPO)기인,촉사소서홍세포과도생성,위험증유관간예약물적체내효응화탐색질병발병궤제제공동물실험대상.방법 취급진고원대서신장조직용RNeasy Mini Kit제취총RNA,통과RT-PCR극륭대서EPO편마기인,구건진핵전염질립,경기육도경주사소서,대소서혈액유관지표적변화진행검측.결과 DNA측서결과 증실,채용RT-RCR방법 성공지극륭료Wistar대서EPO편마기인,기편마서렬여GenBank발포적서렬gi:8393315완전일치,병구건진핵전염재체pcDNA3/EPO,경기내주사후현저촉진소서적홍세포생성,여대조조상비,각실험조소서전혈홍세포압적(Hct),외주혈망직홍세포비례이급혈장홍세포생성소(EPO)수평증가균유현저성(P＜0.05,P＜0.01),각항지표치수질립용량적증가이상승.결론 통과기주도입외원EPO기인시촉진소서홍세포과도생성적유효방법 ,본실험방법 간단역행,무수특수설비조건,위재고원실지개전상관연구제공료량호적기출.
