CAJ | 학술논문

[目的]研究生长激素(GH)对性激素抑制下的离体青春期大鼠生长板软骨细胞表皮生长因子(EGF)mRNA表达及其蛋白合成、分泌的影响.[方法]3周龄雌性SD大鼠开始注射促性腺激素释放激素拟似物(GnRHa)至7周龄,随后分离培养5～8只大鼠胫骨生长板原代软骨细胞,分为时效组和量效组.采用四氮甲基唑蓝(MTT)以及免疫组化法测定增殖细胞核抗原(PCNA),观察不同剂量、不同干预时间的生长激素对性激素抑制下的离体青春期大鼠生长板软骨细胞增殖的影响.用RT-PCR法检测软骨细胞EGF mRNA的表达,酶联免疫吸附法(ELISA)测定EGF的表达.[结果]生长激素以时效和量效作用方式对雌激素受抑的离体青春期大鼠生长板软骨细胞增殖呈双相型影响.GH作用6 h后软骨细胞的EGF mRNA表达显著增加(与0 h比较P＜0.05),且从6 h到24 h间存在明显的时间依赖性(组间P＜0.05),在18 h达到最高峰.GH作用12 h后软骨细胞分泌入培养基中的的EGF表达显著增加(与0 h比较P＜0.05),且从12 h到48 h间存在明显的时间依赖性(组间P＜0.05),在36 h达到最高峰.量效关系显示50 ng/mL浓度的GH开始能显著增加培养基中EGF mRNA和蛋白的表达,且从50 ng/mL至1000 ng/mL间存在明显的浓度依赖性(组间P＜0.05),在100 ng/mL时表达达到最高峰.[结论]生长激素能促进性激素抑制下的离体青春期大鼠生长板软骨细胞的增殖及EGF mRNA和蛋白的表达.
[목적]연구생장격소(GH)대성격소억제하적리체청춘기대서생장판연골세포표피생장인자(EGF)mRNA표체급기단백합성、분비적영향.[방법]3주령자성SD대서개시주사촉성선격소석방격소의사물(GnRHa)지7주령,수후분리배양5～8지대서경골생장판원대연골세포,분위시효조화량효조.채용사담갑기서람(MTT)이급면역조화법측정증식세포핵항원(PCNA),관찰불동제량、불동간예시간적생장격소대성격소억제하적리체청춘기대서생장판연골세포증식적영향.용RT-PCR법검측연골세포EGF mRNA적표체,매련면역흡부법(ELISA)측정EGF적표체.[결과]생장격소이시효화량효작용방식대자격소수억적리체청춘기대서생장판연골세포증식정쌍상형영향.GH작용6 h후연골세포적EGF mRNA표체현저증가(여0 h비교P＜0.05),차종6 h도24 h간존재명현적시간의뢰성(조간P＜0.05),재18 h체도최고봉.GH작용12 h후연골세포분비입배양기중적적EGF표체현저증가(여0 h비교P＜0.05),차종12 h도48 h간존재명현적시간의뢰성(조간P＜0.05),재36 h체도최고봉.량효관계현시50 ng/mL농도적GH개시능현저증가배양기중EGF mRNA화단백적표체,차종50 ng/mL지1000 ng/mL간존재명현적농도의뢰성(조간P＜0.05),재100 ng/mL시표체체도최고봉.[결론]생장격소능촉진성격소억제하적리체청춘기대서생장판연골세포적증식급EGF mRNA화단백적표체.