肿瘤防治研究
腫瘤防治研究
종류방치연구
CANCER RESEARCH ON PREVENTION AND TREATMENT
2007年
2期
128-131,164
,共5页
平浩%张军晖%陈晓春%鲁功成
平浩%張軍暉%陳曉春%魯功成
평호%장군휘%진효춘%로공성
端粒酶逆转录酶%短发夹状RNA%前列腺癌%凋亡
耑粒酶逆轉錄酶%短髮夾狀RNA%前列腺癌%凋亡
단립매역전록매%단발협상RNA%전렬선암%조망
目的 研究靶向端粒酶逆转录酶(hTERT)的短发夹状RNA(shRNA)基因转染对前列腺癌细胞体外生长的抑制效应及其促细胞凋亡作用.方法 在脂质体介导下将针对hTERT基因的shRNA表达载体psilencer-TRT转染前列腺癌细胞PC-3m,得到稳定细胞株PC-3m/shRNA-TRT.采用RT-PCR检测hTERT基因表达情况,western blot分析各组细胞hTERT及c-myc蛋白表达变化,细胞计数并绘制细胞生长曲线,Hoechst33258染色、透射电镜、流式细胞仪检测细胞凋亡情况.结果 重组质粒psilencer-TRT转录生成的shRNA使实验组细胞的hTERT基因表达显著下调,抑制率约为89.02%;同时实验组细胞hTERT及c-myc蛋白水平较对照组有明显下降,细胞的生长增殖能力也显著降低(P＜0.05),生长速率明显变慢,部分细胞呈现凋亡形态学改变,凋亡率为(19.69±4.75)%.结论 hTERT短发夹状RNA能有效抑制前列腺癌细胞中hTERT表达及癌细胞生长,诱导PC-3m细胞凋亡,可望为前列腺癌的基因治疗提供新方法.
目的 研究靶嚮耑粒酶逆轉錄酶(hTERT)的短髮夾狀RNA(shRNA)基因轉染對前列腺癌細胞體外生長的抑製效應及其促細胞凋亡作用.方法 在脂質體介導下將針對hTERT基因的shRNA錶達載體psilencer-TRT轉染前列腺癌細胞PC-3m,得到穩定細胞株PC-3m/shRNA-TRT.採用RT-PCR檢測hTERT基因錶達情況,western blot分析各組細胞hTERT及c-myc蛋白錶達變化,細胞計數併繪製細胞生長麯線,Hoechst33258染色、透射電鏡、流式細胞儀檢測細胞凋亡情況.結果 重組質粒psilencer-TRT轉錄生成的shRNA使實驗組細胞的hTERT基因錶達顯著下調,抑製率約為89.02%;同時實驗組細胞hTERT及c-myc蛋白水平較對照組有明顯下降,細胞的生長增殖能力也顯著降低(P＜0.05),生長速率明顯變慢,部分細胞呈現凋亡形態學改變,凋亡率為(19.69±4.75)%.結論 hTERT短髮夾狀RNA能有效抑製前列腺癌細胞中hTERT錶達及癌細胞生長,誘導PC-3m細胞凋亡,可望為前列腺癌的基因治療提供新方法.
목적 연구파향단립매역전록매(hTERT)적단발협상RNA(shRNA)기인전염대전렬선암세포체외생장적억제효응급기촉세포조망작용.방법 재지질체개도하장침대hTERT기인적shRNA표체재체psilencer-TRT전염전렬선암세포PC-3m,득도은정세포주PC-3m/shRNA-TRT.채용RT-PCR검측hTERT기인표체정황,western blot분석각조세포hTERT급c-myc단백표체변화,세포계수병회제세포생장곡선,Hoechst33258염색、투사전경、류식세포의검측세포조망정황.결과 중조질립psilencer-TRT전록생성적shRNA사실험조세포적hTERT기인표체현저하조,억제솔약위89.02%;동시실험조세포hTERT급c-myc단백수평교대조조유명현하강,세포적생장증식능력야현저강저(P＜0.05),생장속솔명현변만,부분세포정현조망형태학개변,조망솔위(19.69±4.75)%.결론 hTERT단발협상RNA능유효억제전렬선암세포중hTERT표체급암세포생장,유도PC-3m세포조망,가망위전렬선암적기인치료제공신방법.
