CAJ | 학술논문

建立检测增殖诱导配体(a proliferation-inducing ligand,APRIL)mRNA的SYBR Green I实时定量PCR方法,了解自身免疫性疾病[系统性红斑狼疮(SLE)、类风湿性关节炎(RA)]患者外周血单个核细胞(PBMC)中APRIL的表达水平,研究APRIL mRNA的表达与自身免疫性疾病发病机制、预后之间的关系.方法构建克隆载体pGEM-T Easy-APRIL作为定量模板,Line Gene FQD-33A荧光定量PCR仪定量检测58例自身免疫性疾病(SLE、RA)确诊病人和20例正常健康献血者的外周血APRIL mRNA表达含量,以APRIL mRNA和内参GAPDH mRNA含量比值作为APRIL表达水平的指标.结果58例自身免疫病患者的APRIL mRNA表达范围3.95～192,均值为29.68±4.5.20例正常对照标本PBMC APRIL mRNA的表达范围3.1～18.7,均值为10.56士2.0.自身免疫病患者外周血中APRIL mRNA的表达水平高于正常对照组,其中久治不愈或疗效差者APRIL mRNA表达水平明显高于初发患者及治疗后缓解患者,但后两组差异无显著性意义.结论成功建立了人APRIL基因表达含量的SYBR Green I实时定量检测方法.自身免疫性疾病(SLE、RA)患者的APRIL mRNA的表达含量升高,其中疗效差久治不愈患者有更高表达水平.研究APRIL表达和自身免疫病发展、早期诊断、预后等相关性,为寻找自身免疫病治疗新靶点打下基础.
건립검측증식유도배체(a proliferation-inducing ligand,APRIL)mRNA적SYBR Green I실시정량PCR방법,료해자신면역성질병[계통성홍반랑창(SLE)、류풍습성관절염(RA)]환자외주혈단개핵세포(PBMC)중APRIL적표체수평,연구APRIL mRNA적표체여자신면역성질병발병궤제、예후지간적관계.방법구건극륭재체pGEM-T Easy-APRIL작위정량모판,Line Gene FQD-33A형광정량PCR의정량검측58례자신면역성질병(SLE、RA)학진병인화20례정상건강헌혈자적외주혈APRIL mRNA표체함량,이APRIL mRNA화내삼GAPDH mRNA함량비치작위APRIL표체수평적지표.결과58례자신면역병환자적APRIL mRNA표체범위3.95～192,균치위29.68±4.5.20례정상대조표본PBMC APRIL mRNA적표체범위3.1～18.7,균치위10.56사2.0.자신면역병환자외주혈중APRIL mRNA적표체수평고우정상대조조,기중구치불유혹료효차자APRIL mRNA표체수평명현고우초발환자급치료후완해환자,단후량조차이무현저성의의.결론성공건립료인APRIL기인표체함량적SYBR Green I실시정량검측방법.자신면역성질병(SLE、RA)환자적APRIL mRNA적표체함량승고,기중료효차구치불유환자유경고표체수평.연구APRIL표체화자신면역병발전、조기진단、예후등상관성,위심조자신면역병치료신파점타하기출.