CAJ | 학술논문

背景:体外扩增是目前解决脐带血干细胞移植所面临的单份脐血造血干祖细胞数不足问题的丰要手段.已有许多关于不同来源的间充质干细胞联合不同细胞因子支持脐血造血干祖细胞体外扩增的报道,而单独应用间充质干细胞对人脐血CD34+细胞体外扩增的报道仍很少.目的:观察应用脐带源间充质干细胞作基质层的体外培养体系对脐血CD34+细胞体外扩增的支持作用.设计、时间及地点:对比观察实验,于2006-03/2007-05在中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所、实验血液学国家重点实验室完成.材料:经产妇知情同意,采集健康足月分娩胎儿脐带9份.方法:应用贴壁培养的方法从正常足月出生儿脐带中分离培养间充质干细胞,通过细胞形态学、免疫表型、分化实验进行鉴定.利用免疫磁珠分离法从正常足月出生儿脐带血中分离CD34+细胞.应用3种不同培养体系进行脐血CD34+细胞的体外扩增:单独应用脐带源间充质干细胞作基质层、细胞因子培养体系和间充质干细胞联合细胞因子培养体系.主要观察指标:应用细胞计数法、集落培养计数法和流式细胞学检测法对扩增后细胞数量、集落形成能力和免疫表型进行分析比较.RT-PCR检测间充质干细胞中细胞因子的表达情况.结果:培养第14天后,间充质干细胞组的CD34+细胞比例明显高于细胞因子联合间充质干细胞组;CD34+细胞总数为培养前的(4.19±1.37)倍,明显高于细胞因子组.培养第7天和第14天,间充质干细胞组的CD34+CD38-细胞亚群比例均高于另两组.RT-PCR结果显示,脐带源间充质干细胞体外可表达干细胞因子和血小板生成素早期干细胞效应因子.结论:单独应用脐带源间危质干细胞可有效地对脐血CD34+细胞进行体外扩增,更有利于保持较早期干、祖细胞的扩增.
배경:체외확증시목전해결제대혈간세포이식소면림적단빈제혈조혈간조세포수불족문제적봉요수단.이유허다관우불동래원적간충질간세포연합불동세포인자지지제혈조혈간조세포체외확증적보도,이단독응용간충질간세포대인제혈CD34+세포체외확증적보도잉흔소.목적:관찰응용제대원간충질간세포작기질층적체외배양체계대제혈CD34+세포체외확증적지지작용.설계、시간급지점:대비관찰실험,우2006-03/2007-05재중국의학과학원중국협화의과대학혈액학연구소、실험혈액학국가중점실험실완성.재료:경산부지정동의,채집건강족월분면태인제대9빈.방법:응용첩벽배양적방법종정상족월출생인제대중분리배양간충질간세포,통과세포형태학、면역표형、분화실험진행감정.이용면역자주분리법종정상족월출생인제대혈중분리CD34+세포.응용3충불동배양체계진행제혈CD34+세포적체외확증:단독응용제대원간충질간세포작기질층、세포인자배양체계화간충질간세포연합세포인자배양체계.주요관찰지표:응용세포계수법、집락배양계수법화류식세포학검측법대확증후세포수량、집락형성능력화면역표형진행분석비교.RT-PCR검측간충질간세포중세포인자적표체정황.결과:배양제14천후,간충질간세포조적CD34+세포비례명현고우세포인자연합간충질간세포조;CD34+세포총수위배양전적(4.19±1.37)배,명현고우세포인자조.배양제7천화제14천,간충질간세포조적CD34+CD38-세포아군비례균고우령량조.RT-PCR결과현시,제대원간충질간세포체외가표체간세포인자화혈소판생성소조기간세포효응인자.결론:단독응용제대원간위질간세포가유효지대제혈CD34+세포진행체외확증,경유리우보지교조기간、조세포적확증.