扬州大学学报（农业与生命科学版）
颺州大學學報（農業與生命科學版）
양주대학학보（농업여생명과학판）
JOURNAL OF YANGZHOU UNIVERSITY(AGRICULTURAL AND LIFE SCIENCE EDITION)
2010年
2期
14-18
,共5页
孙敏%倪黎刚%施青青%阴彦辉%傅德智%高波%李碧春
孫敏%倪黎剛%施青青%陰彥輝%傅德智%高波%李碧春
손민%예려강%시청청%음언휘%부덕지%고파%리벽춘
睾丸注射法%Mx蛋白%转基因鸡
睪汍註射法%Mx蛋白%轉基因鷄
고환주사법%Mx단백%전기인계
采用脂质体转染法,将线性化pcDNA3.0-MMx质粒随机打点注射入18周龄青年公鸡睾丸内,术后观察公鸡日常活动、常规检测精子;采集转染后25、50、75 d公鸡精液,并于转染70 d后人工采精,授精于正常母鸡,产生F1后代,采用常规PCR检测技术,检测证实外源Mx基因的整合情况,探讨外源Mx基因在鸡体内稳定整合和遗传的能力.结果表明:手术法转染外源基冈过程对公鸡的生殖功能未造成明显影响;PCR检测证实外源Mx基因已整合到精子基因组,且能通过体外受精传递给后代,后代PCR检测的阳性率为27.27%(6/22).证明外源Mx基因能稳定整合到基因组上,睾丸内注射法可能是一种切实可行、易于推广的制备抗病转基因鸡的方法.
採用脂質體轉染法,將線性化pcDNA3.0-MMx質粒隨機打點註射入18週齡青年公鷄睪汍內,術後觀察公鷄日常活動、常規檢測精子;採集轉染後25、50、75 d公鷄精液,併于轉染70 d後人工採精,授精于正常母鷄,產生F1後代,採用常規PCR檢測技術,檢測證實外源Mx基因的整閤情況,探討外源Mx基因在鷄體內穩定整閤和遺傳的能力.結果錶明:手術法轉染外源基岡過程對公鷄的生殖功能未造成明顯影響;PCR檢測證實外源Mx基因已整閤到精子基因組,且能通過體外受精傳遞給後代,後代PCR檢測的暘性率為27.27%(6/22).證明外源Mx基因能穩定整閤到基因組上,睪汍內註射法可能是一種切實可行、易于推廣的製備抗病轉基因鷄的方法.
채용지질체전염법,장선성화pcDNA3.0-MMx질립수궤타점주사입18주령청년공계고환내,술후관찰공계일상활동、상규검측정자;채집전염후25、50、75 d공계정액,병우전염70 d후인공채정,수정우정상모계,산생F1후대,채용상규PCR검측기술,검측증실외원Mx기인적정합정황,탐토외원Mx기인재계체내은정정합화유전적능력.결과표명:수술법전염외원기강과정대공계적생식공능미조성명현영향;PCR검측증실외원Mx기인이정합도정자기인조,차능통과체외수정전체급후대,후대PCR검측적양성솔위27.27%(6/22).증명외원Mx기인능은정정합도기인조상,고환내주사법가능시일충절실가행、역우추엄적제비항병전기인계적방법.
