微生物学免疫学进展
微生物學免疫學進展
미생물학면역학진전
PROGRESS IN MICROBIOLOGY AND IMMUNOLOGY
2005年
4期
22-27
,共6页
席晓蓉%易山%杨芳%李鸿钧%刘馨%孙茂盛
席曉蓉%易山%楊芳%李鴻鈞%劉馨%孫茂盛
석효용%역산%양방%리홍균%류형%손무성
HBsAg%GM-CSF%融合蛋白%毕赤酵母%免疫原性
HBsAg%GM-CSF%融閤蛋白%畢赤酵母%免疫原性
HBsAg%GM-CSF%융합단백%필적효모%면역원성
为探索一种提高乙肝病毒表面抗原免疫原性的新方法,用PCR和基因重组技术构建HBsAg与GM-CSF的融合基因,并在毕赤酵母中分泌表达HBsAg/GM-CSF(S-GM)融合蛋白.表达产物用SDS-PAGE检测,Western blot分析,离子交换柱纯化后免疫昆明鼠,ELISA检测免疫小鼠血清中抗HBsAg的抗体水平.结果显示S-GM融合蛋白在毕赤酵母中获得了表达,离子交换柱一步纯化即可得到纯度达90%以上的S-GM.Western blot分析S-GM可分别与抗HBsAg及抗GM-CSF的抗体特异结合.ELISA检测发现第一次免疫后4w出现抗HBsAg的抗体,加强免疫后融合蛋白组几乎全部阳转,且抗体水平较HBsAg组(P=0.009＜0.05)及HBsAg和GM-CSF的混合物组(P＝0.032＜0.05)高.HBsAg/GM-CSF融合蛋白能够在毕赤酵母中表达,且可增强HBsAg的免疫原性,为提高乙肝疫苗的免疫效果提供了新的思路与方法.
為探索一種提高乙肝病毒錶麵抗原免疫原性的新方法,用PCR和基因重組技術構建HBsAg與GM-CSF的融閤基因,併在畢赤酵母中分泌錶達HBsAg/GM-CSF(S-GM)融閤蛋白.錶達產物用SDS-PAGE檢測,Western blot分析,離子交換柱純化後免疫昆明鼠,ELISA檢測免疫小鼠血清中抗HBsAg的抗體水平.結果顯示S-GM融閤蛋白在畢赤酵母中穫得瞭錶達,離子交換柱一步純化即可得到純度達90%以上的S-GM.Western blot分析S-GM可分彆與抗HBsAg及抗GM-CSF的抗體特異結閤.ELISA檢測髮現第一次免疫後4w齣現抗HBsAg的抗體,加彊免疫後融閤蛋白組幾乎全部暘轉,且抗體水平較HBsAg組(P=0.009＜0.05)及HBsAg和GM-CSF的混閤物組(P＝0.032＜0.05)高.HBsAg/GM-CSF融閤蛋白能夠在畢赤酵母中錶達,且可增彊HBsAg的免疫原性,為提高乙肝疫苗的免疫效果提供瞭新的思路與方法.
위탐색일충제고을간병독표면항원면역원성적신방법,용PCR화기인중조기술구건HBsAg여GM-CSF적융합기인,병재필적효모중분비표체HBsAg/GM-CSF(S-GM)융합단백.표체산물용SDS-PAGE검측,Western blot분석,리자교환주순화후면역곤명서,ELISA검측면역소서혈청중항HBsAg적항체수평.결과현시S-GM융합단백재필적효모중획득료표체,리자교환주일보순화즉가득도순도체90%이상적S-GM.Western blot분석S-GM가분별여항HBsAg급항GM-CSF적항체특이결합.ELISA검측발현제일차면역후4w출현항HBsAg적항체,가강면역후융합단백조궤호전부양전,차항체수평교HBsAg조(P=0.009＜0.05)급HBsAg화GM-CSF적혼합물조(P＝0.032＜0.05)고.HBsAg/GM-CSF융합단백능구재필적효모중표체,차가증강HBsAg적면역원성,위제고을간역묘적면역효과제공료신적사로여방법.
