生物加工过程
生物加工過程
생물가공과정
CHINESE JOURNAL OF BIOPROCESS ENGINEERING
2006年
1期
44-49
,共6页
定向进化%β-糖苷酶%低聚糖%转糖基反应%水解反应
定嚮進化%β-糖苷酶%低聚糖%轉糖基反應%水解反應
정향진화%β-당감매%저취당%전당기반응%수해반응
对携带糖苷酶基因pBBGly的质粒pBtac2进行易错PCR定向进行研究,以改良其合成低聚糖催化性能.来源于Thermus thermophilus的耐高温β-糖苷酶,通过一轮易错PCR随机突变和限制性酶切再连接介导的体外基因重组,获得了两株高转糖基活性的突变酶:N339TF401S和F401S.它们能以天然糖类为糖基受体,低聚糖的合成得率分别为48%和62%,是野生型酶的6～8倍,而底物的水解活力只有野生型酶的0.08%和1.3%.另外,在突变酶的酶反应中,糖基受体对供体的水解反应有显著的促进作用,而野生型酶没有此特征.并且它们的催化水解动力学特征也明显区别于野生酶,水解反应初始浓度对速度关系呈一条直线.
對攜帶糖苷酶基因pBBGly的質粒pBtac2進行易錯PCR定嚮進行研究,以改良其閤成低聚糖催化性能.來源于Thermus thermophilus的耐高溫β-糖苷酶,通過一輪易錯PCR隨機突變和限製性酶切再連接介導的體外基因重組,穫得瞭兩株高轉糖基活性的突變酶:N339TF401S和F401S.它們能以天然糖類為糖基受體,低聚糖的閤成得率分彆為48%和62%,是野生型酶的6～8倍,而底物的水解活力隻有野生型酶的0.08%和1.3%.另外,在突變酶的酶反應中,糖基受體對供體的水解反應有顯著的促進作用,而野生型酶沒有此特徵.併且它們的催化水解動力學特徵也明顯區彆于野生酶,水解反應初始濃度對速度關繫呈一條直線.
대휴대당감매기인pBBGly적질립pBtac2진행역착PCR정향진행연구,이개량기합성저취당최화성능.래원우Thermus thermophilus적내고온β-당감매,통과일륜역착PCR수궤돌변화한제성매절재련접개도적체외기인중조,획득료량주고전당기활성적돌변매:N339TF401S화F401S.타문능이천연당류위당기수체,저취당적합성득솔분별위48%화62%,시야생형매적6～8배,이저물적수해활력지유야생형매적0.08%화1.3%.령외,재돌변매적매반응중,당기수체대공체적수해반응유현저적촉진작용,이야생형매몰유차특정.병차타문적최화수해동역학특정야명현구별우야생매,수해반응초시농도대속도관계정일조직선.
