中国组织工程研究与临床康复
中國組織工程研究與臨床康複
중국조직공정연구여림상강복
JOURNAL OF CLINICAL REHABILITATIVE TISSUE ENGINEERING RESEARCH
2008年
16期
3115-3118
,共4页
WISH细胞%siRNA%转染%羊膜细胞
WISH細胞%siRNA%轉染%羊膜細胞
WISH세포%siRNA%전염%양막세포
目的:检索中国期刊全文数据库2005/2008相关文献显示,RNA干扰研究中,转染效率的高低直接决定siRNA 的表达效果,目前关于应用小分子干扰RNA对人羊膜WISH细胞转染效率的检测研究少见.实验应用化学合成siRNA转染人羊膜WISH细胞,通过流式细胞仪检测转染效率,并初步检测转染对细胞凋亡的影响.方法:实验于2007-03/12在广州医学院试验医学研究中心完成.①实验材料:实验中应用的人羊膜WISH细胞株购于中国科学院上海生命科学研究所.②实验方法:应用0,5,10,20,30 nmol/L化学合成的CY3-Negative siRNA转染人羊膜WISH细胞,转染后24 h应用荧光显微镜和流式细胞仪定性、定量评估其转染效率;20 nmol/L CY3-Negative-siRNA转染细胞24 h后,应用Annexin V-EGFP试剂盒检测细胞早期凋亡情况.结果:荧光显微镜显示,5,10,20,30 nmol/L CY3- Negative siRNA转染细胞内均可见红色荧光,对照组无荧光信号.20 ,30 nmol/L CY3-Negative siRNA 的转染效率明显高于5,10 nmol/L组(P < 0.05);20 nmol/L和30 nmol/L siRNA组转染效率差异不显著(P > 0.05).检测20 nmol/L Negative siRNA转染细胞24 h后的细胞早期凋亡情况,转染组与对照组细胞早期凋亡率分别为1.96 %和2.36 %,两组之间细胞早期凋亡率差异不显著.结论:①化学合成的siRNA可以成功转染人羊膜WISH细胞,转染后对细胞的早期凋亡率无影响.②20 nmol/L的siRNA即可获得理想的转染效果.
目的:檢索中國期刊全文數據庫2005/2008相關文獻顯示,RNA榦擾研究中,轉染效率的高低直接決定siRNA 的錶達效果,目前關于應用小分子榦擾RNA對人羊膜WISH細胞轉染效率的檢測研究少見.實驗應用化學閤成siRNA轉染人羊膜WISH細胞,通過流式細胞儀檢測轉染效率,併初步檢測轉染對細胞凋亡的影響.方法:實驗于2007-03/12在廣州醫學院試驗醫學研究中心完成.①實驗材料:實驗中應用的人羊膜WISH細胞株購于中國科學院上海生命科學研究所.②實驗方法:應用0,5,10,20,30 nmol/L化學閤成的CY3-Negative siRNA轉染人羊膜WISH細胞,轉染後24 h應用熒光顯微鏡和流式細胞儀定性、定量評估其轉染效率;20 nmol/L CY3-Negative-siRNA轉染細胞24 h後,應用Annexin V-EGFP試劑盒檢測細胞早期凋亡情況.結果:熒光顯微鏡顯示,5,10,20,30 nmol/L CY3- Negative siRNA轉染細胞內均可見紅色熒光,對照組無熒光信號.20 ,30 nmol/L CY3-Negative siRNA 的轉染效率明顯高于5,10 nmol/L組(P < 0.05);20 nmol/L和30 nmol/L siRNA組轉染效率差異不顯著(P > 0.05).檢測20 nmol/L Negative siRNA轉染細胞24 h後的細胞早期凋亡情況,轉染組與對照組細胞早期凋亡率分彆為1.96 %和2.36 %,兩組之間細胞早期凋亡率差異不顯著.結論:①化學閤成的siRNA可以成功轉染人羊膜WISH細胞,轉染後對細胞的早期凋亡率無影響.②20 nmol/L的siRNA即可穫得理想的轉染效果.
목적:검색중국기간전문수거고2005/2008상관문헌현시,RNA간우연구중,전염효솔적고저직접결정siRNA 적표체효과,목전관우응용소분자간우RNA대인양막WISH세포전염효솔적검측연구소견.실험응용화학합성siRNA전염인양막WISH세포,통과류식세포의검측전염효솔,병초보검측전염대세포조망적영향.방법:실험우2007-03/12재엄주의학원시험의학연구중심완성.①실험재료:실험중응용적인양막WISH세포주구우중국과학원상해생명과학연구소.②실험방법:응용0,5,10,20,30 nmol/L화학합성적CY3-Negative siRNA전염인양막WISH세포,전염후24 h응용형광현미경화류식세포의정성、정량평고기전염효솔;20 nmol/L CY3-Negative-siRNA전염세포24 h후,응용Annexin V-EGFP시제합검측세포조기조망정황.결과:형광현미경현시,5,10,20,30 nmol/L CY3- Negative siRNA전염세포내균가견홍색형광,대조조무형광신호.20 ,30 nmol/L CY3-Negative siRNA 적전염효솔명현고우5,10 nmol/L조(P < 0.05);20 nmol/L화30 nmol/L siRNA조전염효솔차이불현저(P > 0.05).검측20 nmol/L Negative siRNA전염세포24 h후적세포조기조망정황,전염조여대조조세포조기조망솔분별위1.96 %화2.36 %,량조지간세포조기조망솔차이불현저.결론:①화학합성적siRNA가이성공전염인양막WISH세포,전염후대세포적조기조망솔무영향.②20 nmol/L적siRNA즉가획득이상적전염효과.
