动物医学进展
動物醫學進展
동물의학진전
PROGRESS IN VETERINARY MEDICINE
2008年
4期
31-34
,共4页
张万江%王秀梅%吴波浪%杨桂香
張萬江%王秀梅%吳波浪%楊桂香
장만강%왕수매%오파랑%양계향
猪表皮生长因子%生物活性%体外CCK-8
豬錶皮生長因子%生物活性%體外CCK-8
저표피생장인자%생물활성%체외CCK-8
为建立一种快速检测猪表皮生长因子(pEGF)活性的方法,用本实验室构建的pEGF酵母表达栽体进行摇瓶培养,通过鉴定为所需要的目的蛋白,用pEGF为添加物培养Balbc/3T3细胞,以pEGF浓度为横坐标,吸光度为纵坐标建立曲线.结果表明,理想的接种细胞的个数为5000个/孔,细胞计数试剂盒(CCK-8)孵育的最佳时间为1.5 h,pEGF和人表皮生长因子(hEGF)标准品,在1 ng/mL～100 ng/m/L,范围内对细胞的增值作用相当,表明pEGF和hEGF有相同的生物学活性.建立了用CCK-8快速测定pEGF活性的方法.
為建立一種快速檢測豬錶皮生長因子(pEGF)活性的方法,用本實驗室構建的pEGF酵母錶達栽體進行搖瓶培養,通過鑒定為所需要的目的蛋白,用pEGF為添加物培養Balbc/3T3細胞,以pEGF濃度為橫坐標,吸光度為縱坐標建立麯線.結果錶明,理想的接種細胞的箇數為5000箇/孔,細胞計數試劑盒(CCK-8)孵育的最佳時間為1.5 h,pEGF和人錶皮生長因子(hEGF)標準品,在1 ng/mL～100 ng/m/L,範圍內對細胞的增值作用相噹,錶明pEGF和hEGF有相同的生物學活性.建立瞭用CCK-8快速測定pEGF活性的方法.
위건립일충쾌속검측저표피생장인자(pEGF)활성적방법,용본실험실구건적pEGF효모표체재체진행요병배양,통과감정위소수요적목적단백,용pEGF위첨가물배양Balbc/3T3세포,이pEGF농도위횡좌표,흡광도위종좌표건립곡선.결과표명,이상적접충세포적개수위5000개/공,세포계수시제합(CCK-8)부육적최가시간위1.5 h,pEGF화인표피생장인자(hEGF)표준품,재1 ng/mL～100 ng/m/L,범위내대세포적증치작용상당,표명pEGF화hEGF유상동적생물학활성.건립료용CCK-8쾌속측정pEGF활성적방법.
