南通大学学报（医学版）
南通大學學報（醫學版）
남통대학학보（의학판）
JOURNAL OF NANTONG UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCES)
2006年
3期
157-159
,共3页
缪爱芳%陈梦玲%沈爱国%严美娟%高尚锋%程纯
繆愛芳%陳夢玲%瀋愛國%嚴美娟%高尚鋒%程純
무애방%진몽령%침애국%엄미연%고상봉%정순
聚合酶链反应%实时荧光定量%TaqMan探针%突触后密度蛋白93%大鼠
聚閤酶鏈反應%實時熒光定量%TaqMan探針%突觸後密度蛋白93%大鼠
취합매련반응%실시형광정량%TaqMan탐침%돌촉후밀도단백93%대서
目的:制备实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)突触后密度蛋白93(PSD93)基因TaqMan探针以进一步研究PSD93表达情况.方法:采用RT-PCR法,从生后1天的SD大鼠大脑组织mRNA中扩增PSD93基因部分CDS区片段,克隆入T载体,筛选阳性克隆、酶切鉴定及序列测定,采用TaqMan探针,以重组质粒为模板绘制标准曲线.结果:RT-PCR法扩增出一特异产物与预期长度113bp相符,DNA序列测序的结果与GenBank提供的已知序列(RNU50717)比较,所克隆的PSD93基因片段与其中的113bp完全相同,与PSD93基因100%同源.以重组质粒为模板绘制标准曲线,相关系数r大于0.99,反应效率为0.95,各点变异系数小于20%.结论:采用RT-PCR和T载体技术成功获得FQ-PCR PSD93基因TaqMan探针.
目的:製備實時熒光定量聚閤酶鏈反應(FQ-PCR)突觸後密度蛋白93(PSD93)基因TaqMan探針以進一步研究PSD93錶達情況.方法:採用RT-PCR法,從生後1天的SD大鼠大腦組織mRNA中擴增PSD93基因部分CDS區片段,剋隆入T載體,篩選暘性剋隆、酶切鑒定及序列測定,採用TaqMan探針,以重組質粒為模闆繪製標準麯線.結果:RT-PCR法擴增齣一特異產物與預期長度113bp相符,DNA序列測序的結果與GenBank提供的已知序列(RNU50717)比較,所剋隆的PSD93基因片段與其中的113bp完全相同,與PSD93基因100%同源.以重組質粒為模闆繪製標準麯線,相關繫數r大于0.99,反應效率為0.95,各點變異繫數小于20%.結論:採用RT-PCR和T載體技術成功穫得FQ-PCR PSD93基因TaqMan探針.
목적:제비실시형광정량취합매련반응(FQ-PCR)돌촉후밀도단백93(PSD93)기인TaqMan탐침이진일보연구PSD93표체정황.방법:채용RT-PCR법,종생후1천적SD대서대뇌조직mRNA중확증PSD93기인부분CDS구편단,극륭입T재체,사선양성극륭、매절감정급서렬측정,채용TaqMan탐침,이중조질립위모판회제표준곡선.결과:RT-PCR법확증출일특이산물여예기장도113bp상부,DNA서렬측서적결과여GenBank제공적이지서렬(RNU50717)비교,소극륭적PSD93기인편단여기중적113bp완전상동,여PSD93기인100%동원.이중조질립위모판회제표준곡선,상관계수r대우0.99,반응효솔위0.95,각점변이계수소우20%.결론:채용RT-PCR화T재체기술성공획득FQ-PCR PSD93기인TaqMan탐침.
