广州中医药大学学报
廣州中醫藥大學學報
엄주중의약대학학보
JOURNAL OF GUANGZHOU UNIVERSITY OF TRADITIONAL CHINESE MEDICINE
2009年
4期
394-397
,共4页
啤酒酵母%鲨烯合酶基因%基因复制%反义酵母表达载体
啤酒酵母%鯊烯閤酶基因%基因複製%反義酵母錶達載體
비주효모%사희합매기인%기인복제%반의효모표체재체
[目的] 克隆啤酒酵母鲨烯合酶基因及构建其基因表达载体,为在微生物体内重建青蒿素合成途径打下基础.[方法]采用聚合酶链反应(PCR)扩增、扩增片段与T-载体连接和克隆片段的序列分析;酶切并回收目的基因,反向插入酵母表达载体pGAPZαA,双酶切鉴定重组子.[结果] 通过PCR扩增获得1 335 bp片段,克隆后经PCR和酶切反应进行了鉴定.初步测序结果与GenBank上已登录的酵母鲨烯合酶基因序列基本吻合,相差仅数个碱基对;将此片段反向插入酵母表达载体pGAPZαA,构建了反义酵母表达载体,并通过双酶切加以鉴定.[结论] 成功克隆了啤酒酵母鲨烯合酶基因并进行了测序,同时构建了反义酵母表达载体.
[目的] 剋隆啤酒酵母鯊烯閤酶基因及構建其基因錶達載體,為在微生物體內重建青蒿素閤成途徑打下基礎.[方法]採用聚閤酶鏈反應(PCR)擴增、擴增片段與T-載體連接和剋隆片段的序列分析;酶切併迴收目的基因,反嚮插入酵母錶達載體pGAPZαA,雙酶切鑒定重組子.[結果] 通過PCR擴增穫得1 335 bp片段,剋隆後經PCR和酶切反應進行瞭鑒定.初步測序結果與GenBank上已登錄的酵母鯊烯閤酶基因序列基本吻閤,相差僅數箇堿基對;將此片段反嚮插入酵母錶達載體pGAPZαA,構建瞭反義酵母錶達載體,併通過雙酶切加以鑒定.[結論] 成功剋隆瞭啤酒酵母鯊烯閤酶基因併進行瞭測序,同時構建瞭反義酵母錶達載體.
[목적] 극륭비주효모사희합매기인급구건기기인표체재체,위재미생물체내중건청호소합성도경타하기출.[방법]채용취합매련반응(PCR)확증、확증편단여T-재체련접화극륭편단적서렬분석;매절병회수목적기인,반향삽입효모표체재체pGAPZαA,쌍매절감정중조자.[결과] 통과PCR확증획득1 335 bp편단,극륭후경PCR화매절반응진행료감정.초보측서결과여GenBank상이등록적효모사희합매기인서렬기본문합,상차부수개감기대;장차편단반향삽입효모표체재체pGAPZαA,구건료반의효모표체재체,병통과쌍매절가이감정.[결론] 성공극륭료비주효모사희합매기인병진행료측서,동시구건료반의효모표체재체.
