中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2011年
4期
285-288
,共4页
马玉媛%郭逸%颜奇坡%叶小丽%张启模%郑霖%田克恭%章金刚
馬玉媛%郭逸%顏奇坡%葉小麗%張啟模%鄭霖%田剋恭%章金剛
마옥원%곽일%안기파%협소려%장계모%정림%전극공%장금강
细胞因子%实时定量RT-PCR%细胞免疫
細胞因子%實時定量RT-PCR%細胞免疫
세포인자%실시정량RT-PCR%세포면역
为了解猪体内细胞免疫应答机制,本研究建立猪细胞因子IL-2、IL-4、IL-10和IFN-γ的TaqMan实时定量RT-PCR检测体系.以五指山小型猪cDNA为模板,扩增IL-2、IL-4、IL-10和IFN-γ的基因保守区,构建相应的重组质粒,并将其作为标准品构建标准曲线.结果显示,各标准曲线的相关系数r值均大于0.990,扩增效率为90%～105%;该检测方法的敏感性较高,IL-4检测下限为1 copies/μL,IL-2、IL-10及IFN-γ检测下限达为102copies/μL;重复性较好,批内重复试验与批间重复试验变异系数均小于5%.本研究为病毒感染后猪体内免疫应答等研究提供方法.
為瞭解豬體內細胞免疫應答機製,本研究建立豬細胞因子IL-2、IL-4、IL-10和IFN-γ的TaqMan實時定量RT-PCR檢測體繫.以五指山小型豬cDNA為模闆,擴增IL-2、IL-4、IL-10和IFN-γ的基因保守區,構建相應的重組質粒,併將其作為標準品構建標準麯線.結果顯示,各標準麯線的相關繫數r值均大于0.990,擴增效率為90%～105%;該檢測方法的敏感性較高,IL-4檢測下限為1 copies/μL,IL-2、IL-10及IFN-γ檢測下限達為102copies/μL;重複性較好,批內重複試驗與批間重複試驗變異繫數均小于5%.本研究為病毒感染後豬體內免疫應答等研究提供方法.
위료해저체내세포면역응답궤제,본연구건립저세포인자IL-2、IL-4、IL-10화IFN-γ적TaqMan실시정량RT-PCR검측체계.이오지산소형저cDNA위모판,확증IL-2、IL-4、IL-10화IFN-γ적기인보수구,구건상응적중조질립,병장기작위표준품구건표준곡선.결과현시,각표준곡선적상관계수r치균대우0.990,확증효솔위90%～105%;해검측방법적민감성교고,IL-4검측하한위1 copies/μL,IL-2、IL-10급IFN-γ검측하한체위102copies/μL;중복성교호,비내중복시험여비간중복시험변이계수균소우5%.본연구위병독감염후저체내면역응답등연구제공방법.
