厦门大学学报（自然科学版）
廈門大學學報（自然科學版）
하문대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF XIAMEN UNIVERSITY (NATURAL SCIENCE)
2011年
3期
612-616
,共5页
郑建华%张平%饶晓璐%王世媛%颜江华
鄭建華%張平%饒曉璐%王世媛%顏江華
정건화%장평%요효로%왕세원%안강화
MALDI-TOF-MS%人重组干细胞因子%二硫键%糖基化
MALDI-TOF-MS%人重組榦細胞因子%二硫鍵%糖基化
MALDI-TOF-MS%인중조간세포인자%이류건%당기화
通过高效液相色谱(HPLC)和质谱技术,对人重组干细胞因子(rhSCF)分子进行分析,以确证其一级结构.将rh-SCF样品胰酶酶切,HPLC-RPC分离,基质辅助激光解吸附电离-飞行时间串联质谱仪(MALDI-TOF-MS)对rhSCF的酶切肽段进行解析,并对rhSCF的O-糖基化和N-糖基化位点进行了分析.结果:(1)rhSCF分子质量得到测定;(2)rhSCF的一级结构得到确认,测定的肽质量谱的覆盖率达到94%,分子中有两对二硫键;(3)鉴定了样品中的N-糖基化位点,并对rhSCF产品的O-及N-连接糖型上的糖结构进行初步探讨.结果显示:rhSCF一级氨基酸序列和二硫键形成位置与理论上一致,糖基化特性符合毕赤酵母表达蛋白的糖基化特点.
通過高效液相色譜(HPLC)和質譜技術,對人重組榦細胞因子(rhSCF)分子進行分析,以確證其一級結構.將rh-SCF樣品胰酶酶切,HPLC-RPC分離,基質輔助激光解吸附電離-飛行時間串聯質譜儀(MALDI-TOF-MS)對rhSCF的酶切肽段進行解析,併對rhSCF的O-糖基化和N-糖基化位點進行瞭分析.結果:(1)rhSCF分子質量得到測定;(2)rhSCF的一級結構得到確認,測定的肽質量譜的覆蓋率達到94%,分子中有兩對二硫鍵;(3)鑒定瞭樣品中的N-糖基化位點,併對rhSCF產品的O-及N-連接糖型上的糖結構進行初步探討.結果顯示:rhSCF一級氨基痠序列和二硫鍵形成位置與理論上一緻,糖基化特性符閤畢赤酵母錶達蛋白的糖基化特點.
통과고효액상색보(HPLC)화질보기술,대인중조간세포인자(rhSCF)분자진행분석,이학증기일급결구.장rh-SCF양품이매매절,HPLC-RPC분리,기질보조격광해흡부전리-비행시간천련질보의(MALDI-TOF-MS)대rhSCF적매절태단진행해석,병대rhSCF적O-당기화화N-당기화위점진행료분석.결과:(1)rhSCF분자질량득도측정;(2)rhSCF적일급결구득도학인,측정적태질량보적복개솔체도94%,분자중유량대이류건;(3)감정료양품중적N-당기화위점,병대rhSCF산품적O-급N-련접당형상적당결구진행초보탐토.결과현시:rhSCF일급안기산서렬화이류건형성위치여이론상일치,당기화특성부합필적효모표체단백적당기화특점.
