河南科学
河南科學
하남과학
HENAN SCIENCE
2012年
2期
192-195
,共4页
徐良%王文静%祖向阳%王小纯
徐良%王文靜%祖嚮暘%王小純
서량%왕문정%조향양%왕소순
肠激酶%Trx-Exendin-4%消化条件%非特异性切割%酶活力
腸激酶%Trx-Exendin-4%消化條件%非特異性切割%酶活力
장격매%Trx-Exendin-4%소화조건%비특이성절할%매활력
选用Invitrogen公司开发的重组肠激酶,在不同反应条件下消化融合蛋白Trx-Exendin-4,用16%的Tricine-SDS-PAGE检测目的多肽Exendin-4与其他切割产物的量.结果表明:温度对肠激酶消化融合蛋白Trx-Exendin-4的影响很大,37℃时酶活力高,以非特异性切割为主;16℃时酶活力居中,特异性切割与非特异性切割共存;4℃时酶活力较低,但以特异性切割为主.获得Exendin-4的最佳消化条件是:1U肠激酶在4℃条件下6h消化3 mg的Trx-Exendin-4,效率最高,特异性最好.
選用Invitrogen公司開髮的重組腸激酶,在不同反應條件下消化融閤蛋白Trx-Exendin-4,用16%的Tricine-SDS-PAGE檢測目的多肽Exendin-4與其他切割產物的量.結果錶明:溫度對腸激酶消化融閤蛋白Trx-Exendin-4的影響很大,37℃時酶活力高,以非特異性切割為主;16℃時酶活力居中,特異性切割與非特異性切割共存;4℃時酶活力較低,但以特異性切割為主.穫得Exendin-4的最佳消化條件是:1U腸激酶在4℃條件下6h消化3 mg的Trx-Exendin-4,效率最高,特異性最好.
선용Invitrogen공사개발적중조장격매,재불동반응조건하소화융합단백Trx-Exendin-4,용16%적Tricine-SDS-PAGE검측목적다태Exendin-4여기타절할산물적량.결과표명:온도대장격매소화융합단백Trx-Exendin-4적영향흔대,37℃시매활력고,이비특이성절할위주;16℃시매활력거중,특이성절할여비특이성절할공존;4℃시매활력교저,단이특이성절할위주.획득Exendin-4적최가소화조건시:1U장격매재4℃조건하6h소화3 mg적Trx-Exendin-4,효솔최고,특이성최호.