中国生物化学与分子生物学报
中國生物化學與分子生物學報
중국생물화학여분자생물학보
CHINESE JOURNAL OF BIOCHEMISTRY AND MOLECULAR BIOLOGY
2001年
6期
743-750
,共8页
吕颂雅%杨复华%刘祖强%齐义鹏
呂頌雅%楊複華%劉祖彊%齊義鵬
려송아%양복화%류조강%제의붕
重组杆状病毒%绿色荧光蛋白(gfp)%侵染历程
重組桿狀病毒%綠色熒光蛋白(gfp)%侵染歷程
중조간상병독%록색형광단백(gfp)%침염역정
用携带杆状病毒极晚期多角体蛋白基因启动子驱动gfp表达的重组病毒rHa-FGP感染棉铃虫三龄幼虫.在感染后不同时间取样,分离不同组织,制片,置于倒置荧光显微镜下观察基因的表达.结果发现,随着感染时间的推移,荧光产生的部位出现更替,随后荧光强度也发生相应的变化.从荧光出现的先后初步推断出杆状病毒对昆虫幼虫的侵染路线:中肠上皮→血淋巴→气管系统→脂肪体/真皮.在幼虫感染后12 h荧光即出现于中肠细胞中,表明此时已有极晚期蛋白表达.说明利用杆状病毒极晚期基因启动子驱动苏云金芽孢杆菌杀虫晶体蛋白基因(cry)表达,从而提高杆状病毒的杀虫毒力是可行的.
用攜帶桿狀病毒極晚期多角體蛋白基因啟動子驅動gfp錶達的重組病毒rHa-FGP感染棉鈴蟲三齡幼蟲.在感染後不同時間取樣,分離不同組織,製片,置于倒置熒光顯微鏡下觀察基因的錶達.結果髮現,隨著感染時間的推移,熒光產生的部位齣現更替,隨後熒光彊度也髮生相應的變化.從熒光齣現的先後初步推斷齣桿狀病毒對昆蟲幼蟲的侵染路線:中腸上皮→血淋巴→氣管繫統→脂肪體/真皮.在幼蟲感染後12 h熒光即齣現于中腸細胞中,錶明此時已有極晚期蛋白錶達.說明利用桿狀病毒極晚期基因啟動子驅動囌雲金芽孢桿菌殺蟲晶體蛋白基因(cry)錶達,從而提高桿狀病毒的殺蟲毒力是可行的.
용휴대간상병독겁만기다각체단백기인계동자구동gfp표체적중조병독rHa-FGP감염면령충삼령유충.재감염후불동시간취양,분리불동조직,제편,치우도치형광현미경하관찰기인적표체.결과발현,수착감염시간적추이,형광산생적부위출현경체,수후형광강도야발생상응적변화.종형광출현적선후초보추단출간상병독대곤충유충적침염로선:중장상피→혈림파→기관계통→지방체/진피.재유충감염후12 h형광즉출현우중장세포중,표명차시이유겁만기단백표체.설명이용간상병독겁만기기인계동자구동소운금아포간균살충정체단백기인(cry)표체,종이제고간상병독적살충독력시가행적.
