CAJ | 학술논문

目的构建含HCMV pp65336～507位氨基酸的重组真核表达质粒pcDNA3.1-pp65作为HCMV pp65基因疫苗,观察其诱导小鼠的细胞免疫应答情况.方法以6～8周龄♀Balb/c小鼠为动物模型,试验组和对照组各6只.试验组于股四头肌注射pp65 DNA疫苗,对照组注射空载体pcDNA 3.1.2组小鼠分别在0 d、5 d、3周注射该DNA疫苗200 μg.在末次免疫后3 d,无菌取小鼠脾细胞,并用ConA和重组HCMV pp65336～507作为抗原刺激,吉氏液染色观察T淋巴细胞的形态学变化,并计算转化率.MTT法对脾脏的特异性杀伤细胞率和淋巴细胞的增殖指数进行测定,间接ELISA定量检测脾细胞上清中IFN-γ的含量.结果 pp65336～507抗原刺激的DNA疫苗免疫鼠脾细胞体积变大,胞浆增多,核仁增多;淋巴细胞增殖试验示pp65336～507抗原能特异性刺激免疫鼠脾细胞增殖;试验组IFN-γ较对照组增高,其含量为800 ng/L.与对照组比较,差异均具显著性(P<0.05).试验组及对照组脾细胞杀伤率分别为:56.05%±13.64%、9.85%±2.06%,试验组脾细胞CTL活性比对照组增高(P<0.05).结论 HCMV pp65 DNA疫苗可诱导小鼠HCMV特异性细胞免疫应答.
목적구건함HCMV pp65336～507위안기산적중조진핵표체질립pcDNA3.1-pp65작위HCMV pp65기인역묘,관찰기유도소서적세포면역응답정황.방법이6～8주령♀Balb/c소서위동물모형,시험조화대조조각6지.시험조우고사두기주사pp65 DNA역묘,대조조주사공재체pcDNA 3.1.2조소서분별재0 d、5 d、3주주사해DNA역묘200 μg.재말차면역후3 d,무균취소서비세포,병용ConA화중조HCMV pp65336～507작위항원자격,길씨액염색관찰T림파세포적형태학변화,병계산전화솔.MTT법대비장적특이성살상세포솔화림파세포적증식지수진행측정,간접ELISA정량검측비세포상청중IFN-γ적함량.결과 pp65336～507항원자격적DNA역묘면역서비세포체적변대,포장증다,핵인증다;림파세포증식시험시pp65336～507항원능특이성자격면역서비세포증식;시험조IFN-γ교대조조증고,기함량위800 ng/L.여대조조비교,차이균구현저성(P<0.05).시험조급대조조비세포살상솔분별위:56.05%±13.64%、9.85%±2.06%,시험조비세포CTL활성비대조조증고(P<0.05).결론 HCMV pp65 DNA역묘가유도소서HCMV특이성세포면역응답.